【摘要】：【目的】:研究多胺(精脒)及多胺合成抑制劑DFMO一定濃度對PC12細胞生長特性的影響,同時探討在其作用下PC12細胞MAPKs信號轉導通路活化表達的特點及其相互之間的關系。 【方法】:取對數(shù)生長期嗜鉻細胞瘤細胞株PC12細胞,按照作用劑的不同分為兩組,即SPD組(分別含SPD1.25,2.5,5,10 mmol/L)和DFMO組(分別含DFMO 2,4,6,8 mmol/L),分別培養(yǎng)4天,每天觀察PC12細胞生長情況。光鏡顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學變化;臺盼藍染色法繪制細胞生長曲線;用四氮唑鹽(MTT)比色試驗檢測細胞的生長或抑制;流式細胞儀檢測細胞周期分布。同時用western-blot法檢測ERK1/2和p38蛋白磷酸化水平,觀察多胺對PC12細胞生長信號轉導途徑的影響。 【結果】:光鏡顯微鏡下觀察到:5,10 mmol/L SPD作用PC12細胞4天后,細胞數(shù)較對照組明顯增多,胞體更加粗大,細胞突起更加細長,分支相連,1.25,2.5 mmol/L SPD作用PC12細胞4天后,與對照組相比無明顯變化;4,6 mmol/L DFMO作用PC12細胞4天后,大部分細胞皺縮變圓,細胞突起消失,出現(xiàn)大量漂浮細胞,2,8 mmol/L DFMO作用PC12細胞4天后與對照組相比大部分細胞變圓,細胞突起變短。臺盼藍染色法繪制細胞生長曲線可見SPD組活細胞數(shù)明顯增多,DFMO組細胞數(shù)減少,而DFMO組加入SPD后與對照組相比沒有明顯變化。MTT
[Abstract]:[aim]: to study the effects of polyamine (spermidine) and polyamine synthesis inhibitor (DFMO) on the growth characteristics of PC12 cells, and to explore the characteristics of the activation and expression of MAPKs signal transduction pathway in PC12 cells and their relationship with each other. [methods]: the logarithmic pheochromocytoma cell line PC12 cells were divided into two groups according to the different agents: SPD group (containing SPD1.25,2.5,5,10 mmol/L) and DFMO group (containing DFMO 2 + 4 + 6 + 8 mmol/L) for 4 days, respectively. The growth of PC12 cells was observed every day. Morphological changes were observed under light microscope; cell growth curve was drawn by trypan blue staining; cell growth or inhibition was detected by tetrazolium (MTT) assay; cell cycle distribution was detected by flow cytometry. The phosphorylation levels of ERK1/2 and p38 proteins were detected by western-blot assay, and the effects of polyamines on the growth signal transduction pathway of PC12 cells were observed. [results]: it was observed under the light microscope that the number of PC12 cells increased significantly, the cell body was thicker, the cell processes were more slender, and the branches were connected with the cells treated with 5 mmol/L SPD for 4 days, compared with the control group. PC12 cells treated with 1.25 mmol/L SPD for 4 days showed no significant change compared with the control group. After 4 days of treatment with 4 mmol/L DFMO, most of PC12 cells became round, the cell processes disappeared, and a large number of floating cells appeared. After 4 days of treatment with 2 ~ 8 mmol/L DFMO, most of the cells became round and the cell processes became shorter than those in the control group. Trypan blue staining showed that the number of living cells in SPD group was significantly increased, but that in DFMO group was decreased, but that in DFMO group was not significantly different from that in control group.
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R341

【共引文獻】

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本文編號：2301085