【摘要】：背景與目的:小分子干擾 RNA(siRNAs)可以高效、特異地阻斷體內(nèi)同源基因的表達(dá),促進(jìn)同源 mRNA 降解,稱為 RNA 干擾(RNAi)。本研究旨在探討 Smad7 基因的 siRNAs 是否能抑制基因的表達(dá)。 方法:我們利用 RNA 干擾技術(shù),設(shè)計并合成了針對 Smad7 基因的siRNAs,用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法瞬時轉(zhuǎn)染 BEP2D 和 BERP35T2 細(xì)胞,用Northern blot 法檢測 RNAi 效應(yīng);同時設(shè)計并合成了綠色熒光蛋白(GFP)的 siRNAs,瞬時轉(zhuǎn)染穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的 BERP35T2 細(xì)胞,檢測熒光強度有無改變。 結(jié)果:RNA 干擾技術(shù)能明顯抑制 Smad7 基因的表達(dá),并能顯著減弱對照組綠色熒光的表達(dá)強度。 結(jié)論:RNA 干擾技術(shù)能高效抑制 Smad7 基因的表達(dá),為進(jìn)一步研究 Smad7 基因功能及 TGF-β 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Background & objective: small molecular interference with RNA (siRNAs) can effectively block the expression of homologous genes in vivo and promote the degradation of homologous mRNA, which is called RNA interference (RNAi). The purpose of this study was to investigate whether siRNAs of Smad7 gene can inhibit gene expression. Methods: using RNA interference technique, we designed and synthesized siRNAs, for Smad7 gene transient transfection into BEP2D and BERP35T2 cells by liposome transfection. RNAi effect was detected by Northern blot method. Meanwhile, the transient transfection of green fluorescent protein (GFP) siRNAs, into BERP35T2 cells expressing green fluorescent protein (GFP) was designed and synthesized, and the fluorescence intensity was detected. Results: RNA interference could significantly inhibit the expression of Smad7 gene and decrease the intensity of green fluorescence in control group. Conclusion: RNA interference technique can effectively inhibit the expression of Smad7 gene, which lays a foundation for further study of Smad7 gene function and TGF- 尾 signal transduction pathway.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R363

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本文編號：2298698