【摘要】： 目的明確蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP-1B)在人脂肪干細(xì)胞(hADSC)分化中的作用及機(jī)制。方法1、hADSC分離培養(yǎng)并鑒定。2、以不同濃度UA(PTP-1B特異性抑制劑)和原釩酸鈉(SV,PTP廣譜抑制劑)干預(yù)hADSC分化,檢測(cè)油紅染色、脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP4)mRNA。3、以UA孵育hADSC測(cè)定PTP-1B活性和胰島素受體(IR)β亞基磷酸化水平;檢測(cè)UA干預(yù)下誘導(dǎo)1-10天PTP-1B、PPARλ、C/EBPα和C/EBPβ表達(dá)。結(jié)果1、hADSC符合干細(xì)胞特性。2、UA組脂滴增多、增大,FABP4表達(dá)隨UA劑量增大而升高,呈劑量依賴性;SV組未見(jiàn)脂滴。3、UA抑制PTP-1B活性,IRβ亞基磷酸化水平、PPARγ和C/EBPα表達(dá)增高,C/EBPβ表達(dá)高峰前移。結(jié)論1、原代培養(yǎng)hADSC成功。2、抑制PTP-1B增強(qiáng)了胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),PPARγ和C/EBPα表達(dá)增高并提前激活C/EBPβ,促進(jìn)hADSC分化。3、抑制PTP可抑制hADSC分化。
[Abstract]:Objective to investigate the role and mechanism of protein tyrosine phosphatase 1B (PTP-1B) in (hADSC) differentiation of human adipose stem cells. Methods 1hADSC was isolated, cultured and identified. (2) different concentrations of UA (PTP-1B specific inhibitor) and sodium orthovanadate (SV,PTP broad-spectrum inhibitor) were used to interfere with the differentiation of hADSC, and oil red staining was detected. Fatty acid binding protein 4 (FABP4) mRNA.3, was incubated with UA to detect PTP-1B activity and insulin receptor (IR) 尾 subunit phosphorylation, PTP-1B,PPAR 位, C/EBP 偽 and C/EBP 尾 expression induced by UA for 1-10 days. Results 1hADSC accorded with the characteristics of stem cells. 2in UA group, lipid droplets increased and FABP4 expression increased in a dose-dependent manner with the increase of UA dose, while in SV group, lipid droplets did not inhibit PTP-1B activity, IR 尾 subunit phosphorylation level, PPAR 緯 and C/EBP 偽 expression increased, and C/EBP 尾 expression peak shifted forward. Conclusion 1. The primary culture of hADSC was successful. 2. Inhibiting PTP-1B enhanced insulin signal transduction, increased the expression of PPAR 緯 and C/EBP 偽 and activated C/EBP 尾 ahead of time, promoted hADSC differentiation, and inhibited PTP could inhibit hADSC differentiation.
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2

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本文編號(hào)：2278917