【摘要】：目的:分離、培養(yǎng)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mMSCs);體外驗(yàn)證mMSCs抑制有絲分裂原和異基因抗原誘發(fā)的脾細(xì)胞免疫反應(yīng)性增殖;動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明mMSCs促進(jìn)植入,減輕急性移植物抗宿主病(GVHD)。方法:1.全骨髓貼壁法和單克隆培養(yǎng)法分離、純化mMSCs,體外連續(xù)傳代,鑒定其生物學(xué)特性。2.MTT法檢測(cè)mMSCs對(duì)脾細(xì)胞增殖的抑制作用;對(duì)細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子分泌的影響。3.觀察mMSCs對(duì)急性GVHD臨床表現(xiàn)、組織病理的影響;動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)其對(duì)T細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子分泌的影響。結(jié)果:1.成功獲得mMSCs,體外連續(xù)傳代30代以上仍能保持生物學(xué)特性穩(wěn)定,具有多向分化潛能,無致瘤性。2.mMSCs抑制脾細(xì)胞的免疫反應(yīng)性增殖,使CD4~+/CD8~+比值升高、CD4~+CD25~+細(xì)胞比例增加。3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,1×10~5mMSCs共移植可以促進(jìn)異基因造血植入,減輕GVHD。5×10~6mMSCs單一輸注可促進(jìn)受致死劑量照射的異基因小鼠自體造血恢復(fù),無GVHD表現(xiàn)。結(jié)論:mMSCs參與移植可以促進(jìn)植入及造血恢復(fù),減輕GVHD。
[Abstract]:Objective: to isolate and culture mouse bone marrow mesenchymal stem cells (mMSCs);) and verify in vitro that mMSCs inhibits the proliferation of splenocytes immunoreactive induced by mitogen and allogeneic antigens. Animal experiments have shown that mMSCs promotes implantation and alleviates (GVHD). Of acute graft-versus-host disease. Methods: 1. Whole bone marrow adherent method and monoclonal culture method were used to isolate and purify mMSCs, in vitro to identify its biological characteristics. 2.MTT assay was used to detect the inhibitory effect of mMSCs on spleen cell proliferation and the effect of mMSCs on cell subsets and cytokine secretion. 3. To observe the effect of mMSCs on the clinical manifestation, histopathology and T cell subsets and cytokine secretion of acute GVHD. The result is 1: 1. The successful passage of mMSCs, in vitro for more than 30 passages could maintain stable biological characteristics, have multidirectional differentiation potential, and have no tumorigenesis. 2.mMSCs inhibited the immune reactive proliferation of splenocytes, increased the ratio of CD4~ / CD8~, and increased the proportion of CD4~ CD25~ cells. In animal experiment, 1 脳 10~5mMSCs co-transplantation could promote allogeneic hematopoietic implantation, and alleviate GVHD.5 脳 10~6mMSCs single infusion could promote autologous hematopoiesis recovery of allogeneic mice exposed to lethal dose, without GVHD manifestation. Conclusion: mMSCs involved in transplantation can promote implantation and hematopoietic recovery, and alleviate GVHD..
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：2276648