【摘要】：目的:構(gòu)建大容量天然人源Fab抗體庫,篩選全人源日本血吸蟲抗獨特型抗體并進行初步鑒定。方法:采集15位健康成人的骨髓淋巴細胞,構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。并以日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原(SEA)及成蟲抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板進行篩選,經(jīng)ELISA鑒定后,對陽性克隆進行可溶性表達。結(jié)果:構(gòu)建了2×109大容量天然人源Fab抗體庫,經(jīng)核苷酸序列分析,證實插入片段為Fab基因片斷。經(jīng)過6輪篩選后,從富集的次級抗體庫中隨機挑取80個克隆,用ELISA法鑒定得到4個可與免疫鼠血清(Ab1)特異性結(jié)合,而不與SEA及SWAP結(jié)合的單克隆抗體(C12、C19、D1、D2),其中C12經(jīng)SDS-PAG
[Abstract]:Aim: to construct a large volume natural human Fab antibody library and to screen human anti idiotypic antibodies against Schistosoma japonicum. Methods: bone marrow lymphocytes from 15 healthy adults were collected and the natural human Fab antibody library was constructed. The serum IgG envelopes of mice immunized with Schistosoma japonicum soluble egg antigen (SEA) and adult worm antigen (SWAP) were screened and identified by ELISA, and the positive clones were expressed in a soluble way. Results: the 2 脳 10 ~ 9 large capacity natural human Fab antibody library was constructed. The nucleotide sequence analysis showed that the inserted fragment was a Fab gene fragment. After six rounds of screening, 80 clones were randomly selected from the enriched secondary antibody library, and four monoclonal antibodies (C12C19D1D _ 2), which could specifically bind to immunized mouse serum (Ab1), but not to SEA and SWAP, were obtained by ELISA assay, of which C12 was identified by SDS-PAG.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學病理學系 南京醫(yī)科大學病理學系 南京醫(yī)科大學病理學系 南京醫(yī)科大學病理學系 南京醫(yī)科大學病理學系
【基金】：國家“863”項目資助(2002AA214181)
【分類號】：R392

【參考文獻】

相關(guān)碩士學位論文 前1條

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【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

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本文編號：2249448