【摘要】：背景與目的： 人微小病毒B19(Human Parvovirus B19)是微小病毒科微小病毒屬中目前已知的唯一使人類致病的病毒，也是動(dòng)物病毒中體積最小結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的DNA病毒。主要經(jīng)呼吸道和血液途徑傳播，可引起社區(qū)局部流行。自1990年首次證實(shí)我國(guó)存在該病毒后，陸續(xù)報(bào)告B19病毒感染是我國(guó)孕婦非免疫性流產(chǎn)、兒童急性再障危象、急性血小板減少性紫癜等疾病的重要病因之一�，F(xiàn)己證實(shí)該病毒同多種兒童及成人疾病有關(guān)。同時(shí)，我國(guó)婦女和兒童血清中保護(hù)性抗體水平低，易發(fā)生該病毒感染。尤其免疫功能低下或缺陷患者可發(fā)生持續(xù)感染和慢性貧血，危及生命。且隨著檢測(cè)手段的改進(jìn)及研究的深入，其疾病譜還在不斷擴(kuò)大。B19病毒基因組長(zhǎng)約5.6kb，編碼兩個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白(VP1和VP2)及一個(gè)主要的非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1)。B19病毒衣殼蛋白主要由VP2蛋白組成，VP1蛋白不超過(guò)衣殼蛋白的10％，其獨(dú)特區(qū)暴露在病毒的表面。B19病毒感染引起的機(jī)體免疫反應(yīng)主要是針對(duì)其結(jié)構(gòu)蛋白VP1和VP2，而VP1除在其氨基端有—227個(gè)氨基酸的獨(dú)特區(qū)外，其余與VP2相同。乙型肝炎病毒(HBV)的感染在人群中比例很高，且感染后體內(nèi)能形成的主要保護(hù)性抗體為針對(duì)表面抗原(HBsAg)的表面抗體(抗-HBs)。本課題的目的是選擇B19-VP2抗原基因和HBsAg基因重組，利用pGEX-5X-1原核表達(dá)載體表達(dá)，從而建立表達(dá)B19和HBV復(fù)合抗原系統(tǒng)，并檢測(cè)此復(fù)合抗原的抗原性，，給HBV和B19病毒重組多價(jià)疫苗的研制和復(fù)合診斷試劑提供抗原。 方法： 根據(jù)GenBank收錄的HBV及B19病毒序列，設(shè)計(jì)PCR引物，并在每條引物前分別加入一定的內(nèi)切酶位點(diǎn)。利用PCR和分子克隆技術(shù)，從含HBV病毒全基因的重
[Abstract]:Background & objective: human parvovirus B19 (Human Parvovirus B19) is the only known human pathogenic virus in the parvovirus genus of the parvovirus family. It is also the smallest and simplest DNA virus in animal viruses. Spread mainly through respiratory and blood channels can cause local epidemics in the community. Since the existence of the virus was first confirmed in China in 1990, it has been reported that B19 infection is one of the important causes of non-immune abortion in pregnant women, acute aplastic crisis in children, acute thrombocytopenic purpura and other diseases in China. It has been confirmed that the virus is associated with a wide range of childhood and adult diseases. At the same time, the level of protective antibody in serum of Chinese women and children is low. In particular, patients with low or defective immune function may suffer from persistent infection and chronic anemia, which can be life-threatening. And with the improvement of detection methods and the deepening of research, The genome length of the virus is about 5.6 kb, which encodes two structural proteins (VP1 and VP2) and a major non-structural protein (NS1) .B19 virus capsid protein, which is composed mainly of VP2 proteins, and the VP1 protein does not exceed 10 kb of capsid protein. The immune response caused by the exposure of the unique region to the surface of the virus. B19 virus infection was mainly directed against its structural proteins VP1 and VP2, while VP1 was the same as VP2 except for the unique region with -227 amino acids at its amino terminal. Hepatitis B virus (HBV) infection is a high proportion in the population, and the main protective antibody formed in the body after infection is the surface antibody against surface antigen (HBsAg) (anti-HBs). The purpose of this paper is to select B19-VP2 antigen gene and HBsAg gene recombination, express by pGEX-5X-1 prokaryotic expression vector, and then establish the expression system of B19 and HBV complex antigen, and detect the antigenicity of the complex antigen. It provides antigens for the preparation of recombinant multivalent vaccine of HBV and B 19 virus and the compound diagnostic reagent. Methods: according to the HBV and B19 virus sequences included in GenBank, PCR primers were designed, and some endonuclease sites were added to each primer. Using PCR and molecular cloning techniques, the weight of the whole gene containing HBV virus
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：2235295