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諾如病毒核酸熒光定量檢測及其衣殼蛋白基因重組腺病毒免疫效果的研究

發(fā)布時間:2018-09-05 06:20
【摘要】: 杯狀病毒(Calicivirus)是一種人畜共患的病原體,是世界范圍內(nèi)人類急性病毒性胃腸炎的主要病原之一,對公共衛(wèi)生有著重要影響。杯狀病毒目前已知能感染人的包括諾如病毒(Norovirus)和札如病毒(Saporovirus)兩個屬,常在醫(yī)院、餐館、學校、托兒所、養(yǎng)老院、軍隊、家庭及其他人群中引起暴發(fā)性非菌性腹瀉。根據(jù)RNA聚合酶區(qū)或外殼蛋白區(qū)的核苷酸和氨基酸序列,可將諾如病毒和札如病毒分為不同的基因組,目前已知諾如病毒基因組Ⅰ(GGⅠ)和Ⅱ(GGⅡ),札如病毒基因組SGⅠ和SGⅡ均可感染人。盡管杯狀病毒引起的急性胃腸炎癥狀(嘔吐、腹瀉和腹部痙攣等)呈自限性,但若治療不及時仍會導致死亡,因此檢測該病毒的感染情況對于疾病控制和臨床診斷均具有重要意義。 近年來我國杯狀病毒性腹瀉發(fā)生率呈上升趨勢,已在多個地區(qū)發(fā)生暴發(fā)流行。但是由于杯狀病毒型別眾多,變異頻繁,其流行具有一定的地域和時間特征。因此,調(diào)查我國不同地區(qū)的杯狀病毒流行特征、建立可靠的檢測技術(shù)并開展其疫苗研究,對于全面掌握我國杯狀病毒病的流行狀況,評估其造成的經(jīng)濟社會負擔及制訂相應(yīng)的控制策略具有重要意義。有鑒于此,本實驗研究了山東濟南地區(qū)存在杯狀病毒感染的流行狀況及其毒株的分子遺傳特點,建立了針對流行毒株檢測的熒光定量PCR技術(shù),并對諾如病毒GGⅡ4型衣殼蛋白基因重組腺病毒(rvAdGⅡ4)免疫效果進行了研究。取得主要結(jié)果如下: 一、濟南地區(qū)嬰幼兒腹瀉病杯狀病毒的流行特征收集了山東濟南市兒童醫(yī)院嬰幼兒病毒性腹瀉糞便標本,使用文獻報道的杯狀病毒特異性引物進行了RT-PCR檢測。發(fā)現(xiàn)在212例病毒性腹瀉標本中,杯狀病毒RT-PCR陽性62例,檢出率為29.25%,2月份為發(fā)病高峰。 將杯狀病毒陽性PCR產(chǎn)物進行克隆和序列分析,結(jié)果表明,所有杯狀病毒均為諾如病毒基因組GGⅡ型,未見GGⅠ型和札如病毒。對39個毒株的序列分析表明,GGⅡ-4基因型占46.15%,GGⅡ-1基因型占35.90%,GGⅡ-2基因型占17.95%。說明杯狀病毒是山東地區(qū)嬰幼兒腹瀉病的主要病原之一,目前以諾如病毒基因組Ⅱ-4型毒株流行為主,與我國其它地區(qū)相似。 對測序毒株進行核苷酸序列的同源性分析,結(jié)果表明其中18株GGⅡ-4型同源性大于95.99%,與Lordsdale株同源性為89.05%~90.15%;14株GGⅡ-1型同源性大于94.16%,與Hawaii株同源性為85.04%~87.59%;7株GGⅡ-2型同源性為大于98.91%,與Melksham株同源性為80.29%~81.02%。39株諾如病毒之間的核苷酸同源性為81.45%~100%。本次測定的基因型內(nèi)部毒株之間的核苷酸同源性大于94.16%,遠高于與參考毒株核苷酸之
[Abstract]:Calix virus (Calicivirus) is a zoonotic pathogen, which is one of the major pathogens of acute viral gastroenteritis in the world and has an important impact on public health. The virus is known to infect humans, including Norovirus (Norovirus) and Zahru (Saporovirus), often causing fulminant non-bacterial diarrhoea in hospitals, restaurants, schools, nurseries, nursing homes, the military, families and other populations. According to the nucleotide and amino acid sequences of RNA polymerase region or coat protein region, Norovirus and Zakuvirus can be divided into different genomes. At present, it is known that the genomes of Norovirus I (GG 鈪,

本文編號:2223448

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