【摘要】： 本課題以長白白眉蝮蛇蛇毒為原料，通過DEAE-Sephadex A-50離子交換層析、Sephadex G-75凝膠層析、Lysine Sepharose TM4B層析得到蛇毒纖溶酶原激活劑。以此為抗原對BALB／C小鼠進行免疫，通過雜交瘤技術(shù)獲得免疫BALB／C小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞的陽性融合細胞株，使用定量的陽性融合細胞誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生效價高的腹水，將小鼠腹水用辛酸．硫酸銨法進行一系列的純化。共獲得4株長白白眉蝮蛇蛇毒纖溶酶原激活劑單克隆抗體，為287、3C11、4E7、4H10。進行較系統(tǒng)的免疫特性的鑒定：4株單抗特異性高，與u-PA、BSA均無交叉反應(yīng)；腹水效價8200～10000；免疫球蛋白亞類為IgG1和IgG2a；4株抗體中，287和3C11可明顯抑制長白白眉蝮蛇蛇毒纖溶酶原激活劑活性，而4E7、4H10則對其活性無明顯影響。287和3C11這2株抗體為建立ELISA法檢測長白白眉蝮蛇蛇毒纖溶酶原激活劑含量以及研究其功能和結(jié)構(gòu)的關(guān)系奠定了基礎(chǔ)，，并為該成分的親和層析提供重要配體。
[Abstract]:In this study, the venom plasminogen activator of snake venom was obtained by DEAE-Sephadex A-50 ion exchange chromatography Sephadex G-75 gel chromatography and Lysine Sepharose TM4B chromatography using Agkistrodon halys venom as raw material. The positive fusion cell lines of spleen cells and myeloma cells of BALB/C mice were obtained by hybridoma technique. The positive fusion cells were induced to produce ascites with high titer by using quantitative positive fusion cells. Mouse ascites were purified by octanoic acid and ammonium sulfate method. Four monoclonal antibodies against plasminogen activator of Agkistrodon acutus venom were obtained. The specific of the McAbs was high, and there was no cross reaction with u-PABSA. The ascites titer was 8200,10000. the immunoglobulin subclasses were IgG1 and IgG2a;. The activity of plasminogen activator in venom of Agkistrodon halys was significantly inhibited by 3C11. However, 4E7H _ (10) had no significant effect on the activity of. 287 and 3C11, which laid a foundation for the detection of plasminogen activator in Agkistrodon halys venom by ELISA, and for the study of the relationship between the function and structure of plasminogen activator of Agkistrodon halys venom. It also provides an important ligand for affinity chromatography.
【學(xué)位授予單位】：沈陽藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R392

【共引文獻】

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1 吳鴻悌,肖棣;復(fù)合型慢性胃炎胃酸分泌功能觀察[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1986年01期

2 杜風(fēng)鳴,蔣珠富,喬志敏,許國銘,周岱云,施天福,蔡凱華,顧福生;血清胃泌素放射免疫測定126例及其對慢性萎縮性胃炎分型診斷的意義[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1981年03期

3 鄧明會;慢性胃炎研究進展[J];恩施醫(yī)專學(xué)報;1994年02期

4 李文展;葉慶林;;胃液“胃癌相關(guān)抗原”的對流免疫電泳檢測在胃癌診斷上的價值[J];福建醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1983年02期

5 朱春蘭 ,趙陰環(huán) ,田素禮 ,張鳳山;原發(fā)性干燥綜合征胃黏膜病理特點分析[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2004年02期

6 施堯,張德中,袁濟民,江紹基,蕭樹東;慢性萎縮性胃炎胃竇G細胞計數(shù)和分泌動態(tài)[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1988年02期

7 王仰坤;王恩升;黃如川;;活檢胃粘膜核仁組成區(qū)嗜銀蛋白觀察研究[J];實用腫瘤雜志;1991年03期

8 馮逸松;;慢性胃竇炎、胃粘膜腸化生與胃癌的關(guān)系 附750例手術(shù)切除胃標(biāo)本病理分析[J];鐵道醫(yī)學(xué);1981年03期

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2 黃藍洋;參夏二術(shù)湯治療慢性萎縮性胃炎脾虛胃熱血瘀證的臨床研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2009年

本文編號：2206511