發(fā)布時間：2018-08-15 15:10

【摘要】：背景與目的 Lactoferricin B(簡稱Lfcin B)是一類富含色氨酸的小分子抗菌肽,是牛乳鐵蛋白(bLf)在消化道內(nèi)經(jīng)胃蛋白酶水解而產(chǎn)生。同其他抗菌肽一樣,Lactoferricin B具有廣譜殺菌活力,此外可能還有抑制病毒和真菌增生、抑殺腫瘤細胞等多種生物學(xué)功能,而對真核細胞幾乎沒有毒性�；谶@種選擇性效應(yīng)和無抗原性的特點,Lactoferricin B有望成為新一代的抗菌、抗病毒、抗腫瘤新藥。然而,天然抗菌肽的來源十分困難,無論以何種生物為來源的抗菌肽,都面臨培養(yǎng)和提取的問題,難以保證每一批次的抗菌肽有一致的生物活性,很難滿足研究和臨床應(yīng)用的需要。因此,利用分子生物學(xué)技術(shù)重組表達外源基因成為獲取目標(biāo)蛋白的最有效途徑。由于抗菌肽對細菌有很強的殺傷作用,不宜在原核系統(tǒng)中直接表達,一般的策略是采用融合表達或在真核細胞(如酵母)中進行表達。本研究采用融合表達的方法,體外合成抗菌肽Lactoferricin B基因并克隆入大腸桿菌中,重組表達Lactoferricin B蛋白。 方法 根據(jù)Lactoferricin B的氨基酸序列,采用大腸桿菌偏愛密碼子反推其基因cDNA序列,化學(xué)合成LactoferricinB基因,并將基因克隆入
[Abstract]:Background & objective Lactoferricin B (is a class of tryptophan rich small molecular antimicrobial peptides, which is produced by hydrolysis of bovine lactoferrin (bLf) in digestive tract by pepsin. Lactoferricin B, like other antimicrobial peptides, has broad-spectrum bactericidal activity, in addition to inhibition of virus and fungal proliferation, inhibition of tumor cells and other biological functions, but almost no toxicity to eukaryotic cells. Lactoferricin B is expected to be a new generation of antimicrobial, antiviral and antitumor drugs based on its selectivity and antigenicity. However, the source of natural antimicrobial peptides is very difficult, no matter what biological source of antimicrobial peptides, are faced with the problem of culture and extraction, it is difficult to ensure that each batch of antimicrobial peptides have consistent biological activity. It is difficult to meet the needs of research and clinical application. Therefore, recombinant expression of foreign gene by molecular biology is the most effective way to obtain target protein. Because antimicrobial peptides have strong killing effect on bacteria, it is not suitable to express them directly in prokaryotic system. The general strategy is to express them by fusion or in eukaryotic cells (E. g. Yeast). In this study, Lactoferricin B gene was synthesized and cloned into Escherichia coli to express Lactoferricin B protein by fusion expression in vitro. Methods according to the amino acid sequence of Lactoferricin B, the LactoferricinB gene was chemically synthesized by using Escherichia coli codon preference codon to deduce its cDNA sequence.
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：Q78

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本文編號：2184582