【摘要】：目的:研究絲裂霉素體外誘導(dǎo)原頭蚴體細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象。方法:應(yīng)用玻璃勻漿器輕研磨法和0.25%胰蛋白酶4℃消化約4～6h后,獲得原頭蚴體細(xì)胞。MTT法篩選出絲裂霉素合適的濃度范圍后,按此濃度范圍將體細(xì)胞分為6組,組間濃度差為10μmol幾。應(yīng)用透射電鏡、瓊脂糖凝膠電泳法、熒光顯微鏡和原位末端標(biāo)記法(TUNEL法)綜合檢測(cè)不同濃度的絲裂霉素于24h、48h處理原頭蚴體細(xì)胞后的變化。結(jié)果:通過(guò)MTT法確定出絲裂霉素的合適濃度范圍為40～80μmol/L,并分為6組。體細(xì)胞經(jīng)不同濃度的藥物處理24h后,透射電鏡下發(fā)現(xiàn)在40μmol/L～70μmol/L的各組細(xì)胞均有凋亡細(xì)胞,細(xì)胞核固縮、凝聚,甚至斷裂,形成凋亡小體。通過(guò)熒光顯微鏡與TUNEL法檢測(cè)到50μmol/L和60μmol/L兩組的細(xì)胞有明顯地凋亡形態(tài)學(xué)改變,以后者細(xì)胞發(fā)生凋亡的細(xì)胞數(shù)最多。熒光染色后,計(jì)算細(xì)胞凋亡率為19.574%,與陰性對(duì)照組相比較,p值0.01。然而,瓊脂糖凝膠電泳法未能出現(xiàn)凋亡細(xì)胞DNA典型的“梯形帶”。48h后,熒光染色計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn),各組發(fā)生凋亡的細(xì)胞數(shù)有所下降,p值0.05,仍以60μmol/L的細(xì)胞凋亡率最高。結(jié)論:提示絲裂霉素可以誘導(dǎo)原頭蚴體細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡,其中60μmol/L的藥物濃度作用24h后的原頭蚴體細(xì)胞發(fā)生凋亡的效果最佳。
[Abstract]:Aim: to study the effect of mitomycin on the apoptosis of protocercaria somatic cells in vitro. Methods: after being digested with 0.25% trypsin at 4 鈩，

本文編號(hào)：2165145