【摘要】： 背景與目的 碘缺乏引起甲狀腺形態(tài)結(jié)構(gòu)以及功能的改變?cè)谌撕蛣?dòng)物的體內(nèi)得到充分證實(shí)。在這一過程中微量元素硒也參與其中。其機(jī)制研究目前主要集中在硒防御超氧化物損傷以及硒影響甲狀腺激素的代謝過程。 以往這方面的動(dòng)物研究大多以原代成年動(dòng)物為研究對(duì)象，而流行病學(xué)調(diào)查顯示世代繁衍生息在低硒低碘地區(qū)的人們，其仔代的甲狀腺往往受到更嚴(yán)重的損傷。目前對(duì)低硒低碘兩因素在仔代不同發(fā)育期甲狀腺中有什么樣的作用還未見有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)在課題組前期已經(jīng)成功建立的動(dòng)物模型基礎(chǔ)上，選定長(zhǎng)期持續(xù)低硒低碘喂養(yǎng)繁殖的仔三代三個(gè)不同發(fā)育時(shí)間點(diǎn)(4日齡、21日齡、成年)的大鼠甲狀腺，對(duì)其進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察、體視學(xué)測(cè)量以及檢測(cè)其甲狀腺上皮細(xì)胞的增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)與甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1(TTF-1)的表達(dá)情況，從濾泡形態(tài)、細(xì)胞增殖情況以及細(xì)胞的功能狀態(tài)等幾方面來進(jìn)行研究，探討低硒低碘對(duì)仔代不同發(fā)育期大鼠甲狀腺形態(tài)和功能的作用。 方法 選取本課題組前期成功建立的人工低硒，低碘飼料喂養(yǎng)繁殖的SD大鼠動(dòng)物模型仔三代胎鼠(F3E)、4日齡(F3P4)、21日齡(F3P21)、成年(F3A)四個(gè)發(fā)育時(shí)間點(diǎn)的大鼠的甲狀腺組織做為研究對(duì)象，每發(fā)育時(shí)間點(diǎn)大鼠分四組：①對(duì)照組(control)、②低硒組(Se~-)、③低碘組(I~-)、④低硒低碘組(Se~-I~-)。分別進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)研究： 1．HE染色后組織學(xué)觀察F3E、F3P4、F3P21、F3A各個(gè)組別的甲狀腺形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。 2．HE染色后體視學(xué)測(cè)量F3P4、F3P21、F3A各個(gè)組別甲狀腺的平均濾泡數(shù)、平均濾泡腔面積，平均濾泡上皮細(xì)胞高度。 3．免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)F3P4、F3P21、F3A各個(gè)組別甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)。 4．免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)F3P4、F3P21、F3A各個(gè)組別甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1(TTF-1)的表達(dá)。 結(jié)果 1．組織形態(tài)觀察結(jié)果：F3A、F3P21、F3P4三個(gè)發(fā)育時(shí)間點(diǎn)：Se~-組大鼠甲狀腺與對(duì)照組相比較結(jié)構(gòu)相似，，其中F3ASe~-組中部分大鼠甲狀腺濾泡有壞死纖維化改變。I~-組與Se~-I~-組甲狀腺形態(tài)結(jié)構(gòu)改變相似，都為小濾泡增生改變，腔小甚至無腔，膠質(zhì)稀薄，上皮細(xì)胞立方至高柱狀。F3E甲狀腺與其他日齡相比呈現(xiàn)明顯的幼稚狀態(tài)，細(xì)胞密集，典型的濾泡少。 2．體視學(xué)測(cè)量結(jié)果：①平均濾泡數(shù)：F3A平均濾泡數(shù)Se~-組與對(duì)照組無差別(P＞0.05)，I~-組與Se~-I~-組濾泡數(shù)多于對(duì)照組與Se~-組(P＜0.01)。F3P21平均濾泡數(shù)Se~-組與對(duì)照組無差別(P＞0.05)，I~-組與Se~-I~-組濾泡數(shù)多于對(duì)照組與Se~-組(P＜0.01)。F3P4平均濾泡數(shù)Se~-組、I~-組與對(duì)照組無差別(P＞0.05)，Se~-I~-組濾泡數(shù)多于其他各組(P＜0.05)。②平均濾泡腔面積：F3A Se~-組與對(duì)照組無差別(P＞0.05)，I~-組與Se~-I~-組濾泡腔面積明顯縮小(P＜0.01)，其中Se~-I~-組縮小最明顯。F3P21對(duì)照組與Se~-組以及I~-組與Se~-I~-組之間沒有差別(P＞0.05)。I~-組與Se~-I~-組的濾泡腔面積明顯小于對(duì)照組與Se~-組(P＜0.01)。F3P4 Se~-組與Se~-I~-組之間有差別(P＜0.05)，其他各組之間均無差別(P＞0.05)。其中I~-組與Se~-I~-組的濾泡腔面積最小。③平均上皮細(xì)胞高度：F3A Se~-組與對(duì)照組之間無差異(P＞0.05)。I~-組與Se~-I~-組細(xì)胞高度增加(P＜0.01)，其中Se~-I~-組濾泡上皮細(xì)胞最高。F3P21各實(shí)驗(yàn)組均與對(duì)照組有顯著差別(P＜0.01)，其中Se~-組細(xì)胞最低，Se~-I~-組細(xì)胞最高。F3P4對(duì)照組與Se~-組以及I~-組與Se~-I~-組之間沒有差別(P＞0.05)。I~-組與Se~-I~-組細(xì)胞高度比對(duì)照組明顯增加(P＜0.01)，其中Se~-I~-組細(xì)胞最高。 3．PCNA表達(dá)結(jié)果：F3A、F3P21、F3P4大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的表達(dá)為從對(duì)照組到Se~-I~-組表達(dá)逐漸增強(qiáng)。對(duì)照組與Se~-組的表達(dá)多為陰性或弱陽性，I~-組與Se~-I~-組的表達(dá)明顯增強(qiáng)(多集中在+++～++++)。四組的強(qiáng)陽性(++++)表達(dá)百分比逐漸增加：F3A各組分別為Control組0％，Se~-組6.3％，I~-組28.6％，Se~-I~-組50％。F3P21各組分別為Control組0％，Se~-組0％，I~-組16.7％，Se~-I~-組21.4％。F3P4各組分別為Control組0％，Se~-組0％，I~-組42.9％，Se~-I~-組33.3％。 4．TTF-1表達(dá)結(jié)果：F3A對(duì)照組的表達(dá)全部集中在陰性或弱陽性，Se~-組、I~-組與Se~-I~-組的表達(dá)明顯增強(qiáng)(多集中在++～++++)。四組強(qiáng)陽性(++++)表達(dá)百分比分別為Control組0％，Se~-組23.5％，I~-組12.5％，Se~-I~-組53.8％。F3P21四組的表達(dá)強(qiáng)度多集中在(+++～++++)，四組的強(qiáng)陽性表達(dá)百分率達(dá)到了Control組61.5％，Se~-組55.6％，I~-組90％，Se~-I~-組85.3％。F3P4四組的表達(dá)之間沒有差異。都無強(qiáng)陽性表達(dá)。 結(jié)論 1．單純的低硒可導(dǎo)致仔三代不同發(fā)育期大鼠的甲狀腺形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使其濾泡數(shù)量增多，體積縮小，上皮細(xì)胞增生。但作用的程度小于低碘。并且低硒低碘的作用有疊加效應(yīng)。低硒的這種作用對(duì)各個(gè)發(fā)育日齡的影響程度不同，是隨著個(gè)體發(fā)育的成熟而逐漸明顯。 2．低硒與低碘都可使仔三代大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)增強(qiáng)，低硒的作用弱于低碘，并且低硒低碘的作用有疊加效應(yīng)。低硒增強(qiáng)PCNA表達(dá)的作用在4日齡時(shí)不明顯，21日齡時(shí)有表現(xiàn)并保持到成年，是一個(gè)隨著個(gè)體的發(fā)育成熟而逐漸明顯的過程。 3．低硒與低碘都可使仔三代大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1(TTF-1)表達(dá)增強(qiáng)，低硒的作用弱于低碘，并且低硒低碘的作用有疊加效應(yīng)。低硒增強(qiáng)TTF-1表達(dá)的作用在4日齡時(shí)沒有表現(xiàn)，21日齡時(shí)有表現(xiàn)并且在成年時(shí)表現(xiàn)最明顯，是一個(gè)隨著個(gè)體的發(fā)育成熟而逐漸明顯的過程。
[Abstract]:Background and purpose
The changes in thyroid morphology and function caused by iodine deficiency are fully confirmed in human and animal bodies. In this process, trace element selenium is also involved. The mechanism research is mainly focused on selenium defense superoxide damage and selenium affecting the metabolic process of thyroid hormone.
In the past, most of the animal studies in this field are based on primary adult animals, and epidemiological surveys show that generations of people who reproduce in low selenium and iodine areas often suffer more serious damage to their offspring's thyroid gland. At present, there is no effect on the role of the two factors of low selenium and low iodine in the thyroid gland of the offspring of the offspring. In this experiment, on the basis of the animal model that has been successfully established in the earlier period of the project, the thyroid gland of the three generation of the offspring of the offspring (4 days of age, 21 days of age, adult) was selected for a long period of long-term sustained low selenium and low iodine feeding, and the histomorphology observation, stereological measurement and detection of the proliferation of thyroid epithelial cells were carried out. The expression of nuclear antigen (PCNA) and thyroid transcription factor 1 (TTF-1), from follicular morphology, cell proliferation and cell functional status were studied to explore the effect of low selenium and iodine on the thyroid morphology and function of rats in different developmental stages of the offspring.
Method
The SD rat model of artificial low selenium and low iodine feed was successfully established in the group of three generation fetal mice (F3E), 4 days of age (F3P4), 21 days of age (F3P21) and four adult (F3A) developmental time points of the rat's thyroid tissue as the research object, and the rats were divided into four groups at each time point: (control), and second group (2). Se~-), low iodine group (I~-), low selenium low iodine group (Se~-I~-).
1.HE staining was used to observe the morphological changes of thyroid tissue in F3E, F3P4, F3P21 and F3A groups.
2. After HE staining, the average follicular number, average follicular cavity area and average follicular epithelial cell height were measured.
3. The expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in thyroid follicular epithelial cells of F3P4, F3P21 and F3A groups was detected by immunohistochemical staining.
4. The expression of thyroid transcription factor-1 (TTF-1) in thyroid follicular epithelial cells of F3P4, F3P21 and F3A groups was detected by immunohistochemical staining.
Result
1. tissue morphology observation: F3A, F3P21, F3P4 three developmental time points: the thyroid gland of group Se~- was similar to that of control group. In group F3ASe~-, the thyroid follicular fibrosis changed in group.I~- and the morphological changes of thyroid gland in group Se~-I~-, which were small follicular hyperplasia, small cavity or even cavity without cavity. The F3E thyroid gland is markedly immature, densely packed, and typically has fewer follicles.
2. the results of stereological measurement: (1) mean follicular number: F3A average follicular number Se~- group and control group no difference (P > 0.05), the number of follicles in group I~- and Se~-I~- group is more than that of control group and Se~- group (P < 0.01).F3P21 average follicular number Se~- group and control group no difference (P > 0.05), I~- group and Se~ group follicular number more than the control group and group (0.01) The average follicular number in group Se~- was no difference between group I~- and control group (P > 0.05). The number of follicles in group Se~-I~- was more than that of other groups (P < 0.05). The mean follicular area of group F3A Se~- group was not different from that of control group (P > 0.05), and the area of follicle cavity in I~- group and Se~-I~- group was significantly reduced (P < 0.01). There was no difference between group Se~-I~- and group Se~-I~- (P > 0.05) the area of follicular cavity in group.I~- and group Se~-I~- was significantly smaller than that between the control group and Se~- group (P < 0.01), there was no difference between the.F3P4 Se~- group and the Se~-I~- group (P < 0.05), and there was no difference between the other groups (P > 0.05). There was no difference between the 3A Se~- group and the control group (P > 0.05) the cell height increased in the.I~- group and the Se~-I~- group (P < 0.01). The highest.F3P21 in the follicle epithelial cells in the Se~-I~- group was significantly different from the control group (P < 0.01), and the Se~- group was the lowest. There was no difference (P > 0.05). The cell height of group.I~- and group Se~-I~- was significantly higher than that of control group (P < 0.01), and Se~-I~- group had the highest cell height.
The expression of 3.PCNA expression: the expression of thyroid follicle epithelial cells in F3A, F3P21, F3P4 rats increased gradually from the control group to the Se~-I~- group. The expression of the control group and the Se~- group was mostly negative or weak positive, the expression of the I~- group and the Se~-I~- group was obviously enhanced (mostly in + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +) in the control group and the Se~-I~- group (+ + + + + + +). 3A group was 0%, group Se~- 6.3%, group I~- 28.6%, Se~-I~- group 50%.F3P21 group 0%, Se~- group 0%, I~- group 16.7%, 21.4%.F3P4 group of Se~-I~- group were Control group 0%, 0% group, 42.9% group.
4.TTF-1 expression results: the expression of F3A control group was all negative or weak positive, Se~- group, group I~- and Se~-I~- group were obviously enhanced (mostly + + + + + +). Four groups of strong positive (+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +). + + + + + + + +), the strong positive expression percentage of four groups reached 61.5% in group Control, 55.6% in group Se~-, 90% in group I~-, and no difference in the expression of 85.3%.F3P4 four groups in group Se~-I~-. No strong positive expression was found.
conclusion
1. simple selenium can lead to the change of thyroid morphologic structure in the three generation of the offspring, which makes the number of follicular follicles increased, the size of the cells and the epithelial cells proliferate. But the effect is less than the low iodine. And the effect of low selenium and iodine is superimposed. The maturity of the ontogeny is gradually apparent.
2. low selenium and low iodine can enhance the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in the thyroid follicular epithelial cells of the three generation rats. The effect of low selenium is weaker than low iodine, and the effect of low selenium and iodine is superimposed. The effect of low selenium and low iodine on the expression of selenium is not obvious at 4 days of age. At the age of 21 days, it is shown and kept to adulthood at the age of 21. The process of mature and gradual development.
3. low selenium and low iodine can enhance the expression of thyroid transcription factor 1 (TTF-1) in the thyroid follicular epithelial cells of the three generation rats. The effect of low selenium is weaker than that of low iodine, and the effect of low selenium and iodine is superimposed. The effect of low selenium on the expression of TTF-1 is not manifested at 4 days of age. At the age of 21 days, the expression of low selenium is the most obvious and most obvious in adulthood. It is a gradual process with the development and maturity of individuals.
【學(xué)位授予單位】：汕頭大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R363

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2 姜洋;長(zhǎng)期低硒、低碘對(duì)仔代發(fā)育期大鼠甲狀腺形態(tài)結(jié)構(gòu)及PCNA、TTF-1表達(dá)的影響[D];汕頭大學(xué);2007年

3 王偉;碘化鉀和碘酸鉀對(duì)碘缺乏大鼠晶狀體影響的對(duì)比研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2003年

4 戴紅;不同碘攝入量社區(qū)甲狀腺功能減退癥的流行病學(xué)隨訪研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

5 楊三東;紅三葉草中硒的生理生化及其富集規(guī)律研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 唐欣;應(yīng)用蛋白質(zhì)表達(dá)指紋圖譜探索肝纖維化早期標(biāo)志物及研究硒代金屬硫蛋白對(duì)肝纖維化的防護(hù)機(jī)理[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

7 萬雯;粗硒的真空蒸餾提純工藝研究[D];昆明理工大學(xué);2006年

8 劉仁平;硒和維生素E對(duì)丙烯酰胺毒性的拮抗作用研究[D];蘇州大學(xué);2006年

9 張洪順;Se納米線的制備及其形成機(jī)理研究[D];天津大學(xué);2006年

10 閆玲;砷誘導(dǎo)人外周血淋巴細(xì)胞凋亡及硒拮抗作用的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

本文編號(hào)：2154896