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一種簡化的分離與培養(yǎng)小鼠原代肝細(xì)胞的方法

發(fā)布時間:2018-07-17 07:50
【摘要】:目的建立一種簡單的能獲得高純度小鼠原代肝細(xì)胞的分離與培養(yǎng)方法。方法將經(jīng)典的兩步灌流法簡化為經(jīng)下腔靜脈逆向脈沖式灌注,利用低速離心法對肝細(xì)胞分離液進(jìn)行純化;利用錐蟲藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活率;培養(yǎng)瓶預(yù)先用鼠尾膠原鋪備,利用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果此法得到了足夠數(shù)量的肝細(xì)胞,細(xì)胞活率大于90%;細(xì)胞可穩(wěn)定貼壁1周。結(jié)論成功建立了一種簡單的分離與培養(yǎng)小鼠原代肝細(xì)胞的方法。
[Abstract]:Objective to establish a simple method for isolation and culture of mouse primary hepatocytes with high purity. Methods the classical two-step perfusion method was simplified as reverse pulse perfusion through the inferior vena cava, the hepatocyte isolate was purified by low speed centrifugation, the cell viability was identified by trypanosomiasis blue staining, and the culture bottle was prepared with rat tail collagen. Cell morphology was observed by inverted microscope. Results A sufficient number of hepatocytes were obtained by this method, the cell viability was more than 90%, and the cells could adhere to the wall for 1 week. Conclusion A simple method for isolation and culture of mouse primary hepatocytes was successfully established.
【作者單位】: 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬青島市市立醫(yī)院消化內(nèi)二科;中國海洋大學(xué)醫(yī)藥學(xué)院;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室;青島市消化疾病重點(diǎn)實驗室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81170337/H0304)
【分類號】:R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號:2129670

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