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人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中Notch信號上調(diào)對破骨細(xì)胞增殖的調(diào)控

發(fā)布時間:2018-07-12 17:03

  本文選題:Notch信號 + 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞; 參考:《中國骨質(zhì)疏松雜志》2014年05期


【摘要】:目的通過研究Notch信號上調(diào)的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,hBMSCs)對破骨細(xì)胞增殖調(diào)控的機(jī)制,探討Notch信號在成骨-破骨偶聯(lián)中的作用。方法用裝載Notch信號胞內(nèi)域NICD1的慢病毒載體(Lentivirus,Lv)轉(zhuǎn)染hBMSCs,收集其分泌的條件培養(yǎng)液(Conditioned Medium,CM)。培養(yǎng)前破骨細(xì)胞系RAW264.7,模擬共培養(yǎng)環(huán)境。定量RT-PCR和ELISA測定轉(zhuǎn)染前后hBMSCs表達(dá)和分泌的M-CSF的情況。cck-8和單板克隆試驗測定RAW264.7的增殖情況。結(jié)果轉(zhuǎn)染慢病毒后,hBMSCs表達(dá)和分泌的M-CSF均有所上調(diào)(分別為P0.01和P0.05);CCK-8和單板克隆試驗的結(jié)果顯示hBMSCs分泌的CM使RAW264.7的細(xì)胞數(shù)量增加(均為P0.01)。結(jié)論 Notch信號上調(diào)的hBMSCs可以通過影響M-CSF的表達(dá)和分泌,作用于破骨前體細(xì)胞,促進(jìn)其增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of Notch signal upregulation in osteoclast proliferation by human bone marrow mesenchymal stem cells (human bone marrow mesenchymal stem cells), and to explore the role of Notch signal in osteoclast coupling. Methods hBMSCs were transfected with lentivirus vector (lentiviruslv) loaded with NICD1 region of Notch signal, and the conditioned medium (CM) was collected. The osteoclast cell line RAW264.7 was cultured in a simulated co-culture environment. The expression and secretion of M-CSF in hBMSCs before and after transfection were determined by quantitative RT-PCR and Elisa. Results the expression and secretion of M-CSF of hBMSCs were up-regulated (P0.01 and P0.05). The results of CCK-8 and veneer clone assay showed that the number of RAW264.7 cells was increased by CM secreted by hBMSCs (all P0.01). Conclusion Notch upregulated hBMSCs can promote the proliferation of osteoclasts by affecting the expression and secretion of M-CSF.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院骨科;
【基金】:國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(2011CB964703) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(2012AA020502-6)
【分類號】:R329

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號:2117856

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