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釉基質(zhì)蛋白誘導(dǎo)MC3T3-E1細胞成骨分化過程中微小核糖核酸的表達

發(fā)布時間:2018-07-05 06:59

  本文選題:微小核糖核酸 + 成骨分化; 參考:《口腔材料器械雜志》2014年04期


【摘要】:目的探討微小核糖核酸(micro ribonucleicacid,mi RNA)是否參與到釉基質(zhì)蛋白(Enamel Matrix Derivative,EMD)誘導(dǎo)的小鼠前成骨細胞系MC3T3-E1細胞成骨分化的過程,并對發(fā)生顯著變化的mi RNA進行分析。方法將MC3T3-E1用含EMD(刺激組)/不含EMD(對照組)的培養(yǎng)液培養(yǎng)0天、7天和14天,檢測堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,實時聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)分析成骨分化標(biāo)記物ALP、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨鈣素(osteocalcin,OC)的信使RNA(m RNA)水平的表達變化。利用基因芯片技術(shù)分析mi RNA的相對表達。結(jié)果 0天、7天、14天的ALP染色結(jié)果顯示隨著培養(yǎng)時間的增加,兩組ALP活性均逐漸增強,EMD刺激組ALP活性增強較對照組更為明顯。RT-PCR結(jié)果表明,與對照組相比,ALP、BSP、OC的m RNA表達量均顯著增加,ALP與OC均于14天時表達量達到峰值,BSP則于7天時處于峰值表達,EMD刺激組MC3T3-E1成骨活性更強;各期11個mi RNA表達上調(diào),28個mi RNA表達下調(diào),其中mi R-335-5p,mi R-503已被證實可參與促進骨形成,而mi R-30家族(mi R-30a,-30b,-30c和-30d)則被證實參與抑制成骨。結(jié)論 mi RNA參與EMD誘導(dǎo)的MC3T3-E1細胞的成骨分化過程,這一發(fā)現(xiàn)可以為了解EMD促進成骨分化的機理及臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)。
[Abstract]:Objective to investigate the role of micro ribonucleic acid (micro) in the process of osteogenic differentiation of mouse preosteogenic cell line MC3T3-E1 induced by Enamel Matrix Derivatives. Methods MC3T3-E1 was incubated with EMD / EMD (control group) for 7 and 14 days, and the activity of alkaline phosphatase was measured. The expression of ALP, bone sialoprotein and osteocalcin OC mRNA was analyzed by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). The relative expression of mi RNA was analyzed by gene chip technique. Results the results of ALP staining on day 0 and day 7 and day 14 showed that ALP activity increased gradually in both groups with the increase of culture time. The results of RT-PCR showed that ALP activity in EMD stimulated group was more obvious than that in control group. Compared with the control group, the mRNA expression of BSPOC was significantly increased. Both ALP and OC reached the peak at 14 days. The osteogenic activity of MC3T3-E1 stimulated by EMD at 7 days was higher than that of the control group, and the expression of 11 mi RNA was up-regulated and 28 mi RNA was down-regulated in each stage. Among them, mi R-335-5pnmmi R-503 has been proved to be involved in promoting bone formation, while the mi R-30 family (mi R-30aan-30ban-30c and -30d) has been proved to be involved in the inhibition of osteogenesis. Conclusion mi RNA is involved in the osteogenic differentiation of MC3T3-E1 cells induced by EMD, which may provide guidance for understanding the mechanism and clinical application of EMD in promoting osteogenic differentiation.
【作者單位】: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院口腔修復(fù)科 上海市口腔醫(yī)學(xué)重點實驗室;唾液腺疾病研究中心 首都醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院牙齒再生與功能重建重點實驗室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81170988) 上海市科學(xué)技術(shù)委員會基金資助項目(11ZR1420200)
【分類號】:R329.2

【參考文獻】

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【共引文獻】

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7 王湞;人牙囊細胞生物學(xué)特性及定向誘導(dǎo)分化的實驗研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

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10 趙華;Emdogain、辛伐他汀及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人牙周膜細胞增殖和分化能力的影響[D];鄭州大學(xué);2007年

【二級參考文獻】

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1 束蓉,李超倫,劉正,王洪海,陳佩麗,劉文;豬釉基質(zhì)蛋白的提取及N末端氨基酸序列分析[J];口腔醫(yī)學(xué)縱橫;1999年02期

2 張偉國,王麗珍,劉正;氟對鼠顱骨成骨細胞表型發(fā)育影響的體外研究[J];上?谇会t(yī)學(xué);1998年02期

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9 李R既,

本文編號:2099388


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