機(jī)械生長因子促骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖作用途徑的初步研究
本文選題:機(jī)械生長因子 + 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞; 參考:《中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志》2014年11期
【摘要】:目的:研究機(jī)械生長因子促進(jìn)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖的量效關(guān)系及可能的作用途徑。方法:選用4周齡雄性SD大鼠1只,無菌條件下取后肢肌肉,采用改進(jìn)的兩步酶消化法結(jié)合差速貼壁技術(shù),分離及純化骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞。免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞。取第3代骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,隨機(jī)分為對照組、DMEM對照組、MGF組(M組)、LY+MGF組(LM組)、PD+MGF組(PM組)和LY+PD+MGF組(LPM組),同步化后,相應(yīng)組細(xì)胞換用含有PI3K特異性抑制劑LY294002(30μM)及MEK特異性抑制劑PD98059(50μM)的生長培養(yǎng)基預(yù)阻斷12 h后,再用含有MGF(25 ng/ml)的生長培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24 h后,用CCK-8比色法、BCA比色法觀察不同抑制劑干預(yù)下SC的增殖及總蛋白含量。結(jié)果:1、PM組和LPM組OD值均顯著低于M組(P0.01),而LM組OD值與M組無顯著差異。2、LM組、PM組、LPM組SC總蛋白含量均顯著低于M組。結(jié)論:MEK/Erk途徑在MGF對衛(wèi)星細(xì)胞促增殖方面有較重要作用。
[Abstract]:Aim: to study the dose-effect relationship and possible mechanism of mechanical growth factor (MGF) on proliferation of skeletal muscle satellite cells. Methods: a 4-week-old male Sprague-Dawley rat was used to isolate and purify skeletal muscle satellite cells under aseptic condition. Identification of skeletal muscle satellite cells by immunocytochemistry. The third generation skeletal muscle satellite cells were randomly divided into DMEM control group (MGF group), LY MGF group (LM group), PD MGF group (PM group) and LY PD MGF group (LPM group). The cells in the corresponding group were preblocked with PI3K-specific inhibitor LY294002 (30 渭 M) and MEK-specific inhibitor PD98059 (50 渭 M) for 12 h, then cultured on the growth medium containing MGF (25 ng/ml) for 24 h. The proliferation and total protein content of SC were observed by CCK-8 colorimetry and BCA colorimetry. Results the OD values of PM group and LPM group were significantly lower than those of M group (P0.01), but the OD value of LM group was not significantly different from that of M group. 2 the SC total protein content in LPM group was significantly lower than that in M group. Conclusion the MGF pathway plays an important role in promoting the proliferation of satellite cells.
【作者單位】: 上海體育學(xué)院運(yùn)動科學(xué)學(xué)院;
【基金】:上海市教委科研創(chuàng)新項(xiàng)目(05IZ02) 運(yùn)動健身科技省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(上海體育學(xué)院)開放基金
【分類號】:R329.2
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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1 張臻,鐘z,
本文編號:2090098
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