本文選題：腦膜炎球菌 + 多糖��； 參考：《中國生物制品學(xué)雜志》2014年08期

【摘要】：目的建立凍干ACYW135群腦膜炎球菌多糖結(jié)合疫苗中多糖含量的測定方法。方法將10支ACYW135群腦膜炎球菌多糖結(jié)合疫苗用注射用水復(fù)溶后,分為10份,70μl/份,依次加入20 mg/ml蛋白酶K溶液0、1、2、3、4、5、6、7、8、9μl,降解結(jié)合物中載體蛋白,采用火箭免疫電泳法進(jìn)行多糖含量的測定,確定蛋白酶K最適加量。對建立的方法進(jìn)行線性范圍、定量限度確定以及準(zhǔn)確度、精密性及專屬性驗證。結(jié)果 20 mg/ml蛋白酶K的最適加量為5μl;該方法的線性范圍為2.5~40μg/ml,定量限度為2.5μg/ml;3個不同濃度的供試品重復(fù)測定3次,A、C、Y、W135群多糖含量的平均回收率分別為99.1%、96.5%、96.5%和97.4%;不同試驗人員在不同時間對同一供試品重復(fù)測定9次,A、C、Y、W135群多糖含量的CV值分別為3.40%、4.11%、3.35%和4.88%;各群多糖抗原均與其對應(yīng)的抗血清產(chǎn)生免疫沉淀,而與其他群抗血清不產(chǎn)生免疫沉淀,具有較強的特異性。結(jié)論建立了凍干ACYW135群腦膜炎球菌多糖結(jié)合疫苗中多糖含量的檢測方法,該方法在確定的限度范圍內(nèi)具有較好的準(zhǔn)確度、精密性及專屬性。
[Abstract]:Objective to establish a method for determining the content of polysaccharide in the lyophilized ACYW135 group meningococcal polysaccharide conjugate vaccine. Methods 10 ACYW135 meningococcal polysaccharide conjugate vaccines were dissolved in 10, 70 mu l/, and 20 mg/ml protease K solution 0,1,2,3,4,5,6,7,8,9 l was added in order to degrade the carrier protein in the conjugate and use rocket The method of immunoelectrophoresis was used to determine the content of polysaccharide and determine the optimum amount of protease K. A linear range, a quantitative limit, accuracy, precision and specificity were used to establish the method. The optimum addition of 20 mg/ml protease K was 5 L; the linear range of the method was 2.5~40 mu g/ml, the quantitative limit was 2.5 u g/ml; 3 different concentrations. The average recovery of the content of A, C, Y and W135 was 99.1%, 96.5%, 96.5% and 97.4%, respectively, for the test samples of A, C, Y and W135, and the CV values of A, C, Y, W135 group polysaccharides were 3.40%, 4.11%, 3.35% and 4.88%, respectively, and the groups of polysaccharide antigens were produced with their corresponding antiserum. Immunoprecipitation and no immunoprecipitation with other group antisera, it has strong specificity. Conclusion the determination method of polysaccharide content in the lyophilized ACYW135 group meningococcal polysaccharide conjugate vaccine is established. The method has good accuracy, precision and specificity in the limits range.
【作者單位】： 云南沃森生物技術(shù)股份有限公司;
【基金】：云南省科技計劃項目(2014AE009)
【分類號】：R392-33;R378.15

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本文編號：2049796