改良大鼠心臟微血管內皮細胞的培養(yǎng)方法及鑒定
發(fā)布時間:2018-06-05 08:06
本文選題:大鼠 + 心臟微血管內皮細胞; 參考:《浙江預防醫(yī)學》2014年01期
【摘要】:目的建立一種分離大鼠心臟微血管內皮細胞的方法。方法雄性SD大鼠2只,快速取出心臟,去除左室外約1/4層,充分剪碎剩余組織,Ⅱ型膠原酶和胰酶先后消化20~30 min,過濾并離心收集細胞,加入培養(yǎng)液置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。結果原代細胞基本于接種后1~2 h已大部分貼壁,24 h細胞充分伸展,并進入對數(shù)生長期,細胞增殖迅速,培養(yǎng)3 d時,可見細胞匯合度達80%~90%,細胞長至融合后呈典型的"鋪路石"或"鵝卵石"征。免疫細胞化學鑒定表明在分離培養(yǎng)的大鼠心臟微血管內皮細胞中有特定Ⅷ因子及CD31表達,體外小管形成實驗證明大鼠心臟微血管內皮細胞具有小管形成的能力。原代周期3~4 d,傳代周期2~3 d,P2代細胞純度達95%以上。傳至P4代仍未見細胞形態(tài)及分裂增殖活性下降。結論本方法培養(yǎng)大鼠心臟微血管內皮細胞簡單有效,重復性好,且獲得細胞數(shù)量多、純度高,有利于實驗人員掌握。
[Abstract]:Objective to establish a method for isolating rat heart microvascular endothelial cells. Methods two male Sprague-Dawley rats were used to remove the heart quickly, remove about a quarter of a layer of left ventricle, and fully cut the remaining tissue. Collagenase 鈪,
本文編號:1981270
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