本文選題：大鼠 + 心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞��； 參考：《浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)》2014年01期

【摘要】：目的建立一種分離大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的方法。方法雄性SD大鼠2只,快速取出心臟,去除左室外約1/4層,充分剪碎剩余組織,Ⅱ型膠原酶和胰酶先后消化20~30 min,過濾并離心收集細(xì)胞,加入培養(yǎng)液置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。結(jié)果原代細(xì)胞基本于接種后1~2 h已大部分貼壁,24 h細(xì)胞充分伸展,并進(jìn)入對數(shù)生長期,細(xì)胞增殖迅速,培養(yǎng)3 d時(shí),可見細(xì)胞匯合度達(dá)80%~90%,細(xì)胞長至融合后呈典型的"鋪路石"或"鵝卵石"征。免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定表明在分離培養(yǎng)的大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞中有特定Ⅷ因子及CD31表達(dá),體外小管形成實(shí)驗(yàn)證明大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有小管形成的能力。原代周期3~4 d,傳代周期2~3 d,P2代細(xì)胞純度達(dá)95%以上。傳至P4代仍未見細(xì)胞形態(tài)及分裂增殖活性下降。結(jié)論本方法培養(yǎng)大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞簡單有效,重復(fù)性好,且獲得細(xì)胞數(shù)量多、純度高,有利于實(shí)驗(yàn)人員掌握。
[Abstract]:Objective to establish a method for isolating rat heart microvascular endothelial cells. Methods two male Sprague-Dawley rats were used to remove the heart quickly, remove about a quarter of a layer of left ventricle, and fully cut the remaining tissue. Collagenase 鈪，

本文編號：1981270