本文選題：呋喃唑酮 + 代謝物��； 參考：《中國(guó)生物制品學(xué)雜志》2014年07期

【摘要】：目的制備呋喃唑酮代謝物AOZ單克隆抗體及其膠體金與熒光淬滅免疫層析試紙條。方法將AOZ衍生成CPAOZ后,與載體蛋白BSA偶聯(lián),制備完全抗原CPAOZ-BSA,經(jīng)皮下多點(diǎn)注射免疫BALB/c小鼠,共5次,取小鼠脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞融合,獲得穩(wěn)定分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株。利用獲得的抗CPAOZ單克隆抗體制備膠體金及熒光淬滅免疫層析試紙條,并對(duì)試紙條的靈敏度及特異性進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果制備的完全抗原經(jīng)紫外掃描鑒定偶聯(lián)成功。共獲得3株能穩(wěn)定分泌抗CPAOZ單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,其中效價(jià)和特異性最好的1株2H11針對(duì)CPAOZ的50%抑制質(zhì)量濃度(IC50)為0.88 ppb。以該抗體制備的膠體金及熒光淬滅免疫層析試紙條的最低檢測(cè)限分別為7.5和0.062 5 ppb;兩種試紙條與其他3種硝基呋喃類(lèi)代謝物CPAMOZ、CPAHD、CPSEM均不存在交叉反應(yīng)。結(jié)論成功制備了抗CPAOZ單抗及其膠體金免疫層析和熒光淬滅免疫層析試紙條,兩種試紙條均具有較高的靈敏度和較強(qiáng)的特異性,其中熒光淬滅免疫層析試紙條的靈敏度較膠體金免疫層析試紙條高約100倍,具有良好的應(yīng)用前景。
[Abstract]:Objective to prepare monoclonal antibody to furazolidone metabolite AOZ, colloidal gold and immunochromatographic strip. Methods AOZ was derived into CPAOZ and conjugated with the carrier protein BSA to prepare the complete antigen CPAOZ-BSA.The BALB/c mice were immunized by subcutaneous multi-point injection for 5 times. The hybridoma cell lines secreting specific antibodies were obtained by fusion of mouse spleen cells with SP2/0 cells. The colloidal gold and immunochromatographic strip were prepared by using the obtained monoclonal antibody against CPAOZ, and the sensitivity and specificity of the strip were verified. Results the complete antigen was successfully coupled by UV scanning. Three hybridoma cell lines secreting monoclonal antibodies against CPAOZ were obtained, of which the 50% inhibitory mass concentration (IC50) of 2H11 against CPAOZ was 0.88 ppb. The minimum detection limits of colloidal gold and fluorescent quenched immunochromatographic strips were 0.062 ppb and 0.062 ppb, respectively, and there was no cross reaction between the two strips and the other three nitrofuran metabolites CPAMOZ CPA HDCPSEM. Conclusion the anti CPAOZ monoclonal antibody and its colloidal gold immunochromatography and fluorescence quenching immunochromatographic strips were successfully prepared. Both of them have high sensitivity and specificity. The sensitivity of immunochromatographic strip is about 100 times higher than that of colloidal gold immunochromatographic strip.
【作者單位】： 暨南大學(xué)廣東省分子免疫與抗體工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：第47批教育部留學(xué)歸國(guó)人員科研啟動(dòng)基金
【分類(lèi)號(hào)】：R392-33

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本文編號(hào)：1978423