本文選題：角質(zhì)形成細(xì)胞 + 分化　； 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2006年碩士論文

【摘要】：目的 分離培養(yǎng)人正常成纖維細(xì)胞及角質(zhì)形成細(xì)胞，研究角質(zhì)形成細(xì)胞分泌的活性物質(zhì)對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖、膠原分泌及細(xì)胞周期的影響；測(cè)定角質(zhì)形成細(xì)胞分泌的活性物質(zhì)，觀測(cè)角質(zhì)形成細(xì)胞分泌的TGF-β_1及IL-1α對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖及Ⅲ型膠原分泌的作用；探討分化前后角質(zhì)形成細(xì)胞對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖及膠原分泌的作用，測(cè)定其不同階段活性因子的表達(dá)差異。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證角質(zhì)形成細(xì)胞分泌的活性物質(zhì)，闡明在創(chuàng)傷愈合及異常瘢痕形成中角質(zhì)形成細(xì)胞的作用，從分子水平論述其作用機(jī)制。方法 實(shí)驗(yàn)第一部分 取小兒包皮，以消化法培養(yǎng)正常角質(zhì)形成細(xì)胞，組織塊法培養(yǎng)成纖維細(xì)胞，收集角質(zhì)形成細(xì)胞上清，配制成各種不同濃度，分別為12％，25％，50％(DMEM組為對(duì)照組)，作用于成纖維細(xì)胞，MTT法測(cè)定其增殖，羥脯胺酸比色法測(cè)定細(xì)胞外膠原分泌；50％濃度上清液及DMEM分別作用于成纖維細(xì)胞，流式細(xì)胞儀測(cè)定成纖維細(xì)胞周期的變化；實(shí)驗(yàn)第二部分 免疫組織化學(xué)方法測(cè)定角質(zhì)形成細(xì)胞分泌的IL-1α，再將實(shí)驗(yàn)分成四組，50％濃度角質(zhì)形成細(xì)胞上清液(CM)為對(duì)照組，其余三組為CM+0.04mg／l IL-1α抗體，CM+0.2mg／l IL-1α抗體，CM+1mg／l IL-1α抗體，分別加入成纖維細(xì)胞培養(yǎng)24h，以CCK—8試劑盒測(cè)定細(xì)胞增殖，放射免疫法測(cè)定膠原分泌。實(shí)驗(yàn)第三部分 與實(shí)驗(yàn)二同樣方法及分組進(jìn)行TGF-β_1對(duì)成纖維細(xì)胞作用的研究，但其中TGF-β_1抗體濃度分別為0.2mg／l，1mg／l，，2mg／l。實(shí)驗(yàn)第四部分 收集融合達(dá)90％及
[Abstract]:Objective to isolate and culture human normal fibroblasts and keratinocytes, to study the effects of the active substances secreted by keratinocytes on the proliferation, collagen secretion and cell cycle of fibroblasts, and to determine the active substances secreted by keratinocytes. To observe the effects of TGF- 尾 1 and IL-1 偽 secreted by keratinocytes on the proliferation of fibroblasts and the secretion of type 鈪

本文編號(hào)：1973710