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光動(dòng)力對(duì)銅綠假單胞菌PAO1浮游菌與生物被膜的體外清除作用

發(fā)布時(shí)間:2018-06-03 16:45

  本文選題:光動(dòng)力療法 + 銅綠假單胞菌; 參考:《中國(guó)激光醫(yī)學(xué)雜志》2014年02期


【摘要】:目的分析新型光敏劑釕化合物(Ru complex)介導(dǎo)的光動(dòng)力治療(Photodynamic therapy,PDT)對(duì)銅綠假單胞菌PAO1浮游菌和生物被膜內(nèi)細(xì)菌活性的影響,觀察PDT對(duì)其生物被膜的清除作用。方法實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)菌懸液和生物被膜模型,均分為四組。細(xì)菌懸液組的光敏劑濃度為0.1、0.25、1、2.5、10和25μM;生物被膜組的光敏劑濃度為1、2.5、10和25μM。(1)PDT組:加入不同濃度的光敏劑后,孵育時(shí)間30 min,采用激光照射,功率密度為40 mW/cm2,照射時(shí)間10 min。(2)單純光敏劑組:光敏劑孵育時(shí)間30 min,不予激光照射。(3)單純照光組:僅激光照射,功率密度40 mW/cm2,照射時(shí)間10 min。(4)空白對(duì)照組:不加入光敏劑,不予激光照射。用稀釋平板法和MTT法分別測(cè)定各組處理后浮游菌存活率和生物被膜內(nèi)細(xì)菌活性。生物被膜經(jīng)過(guò)沖洗、固定、結(jié)晶紫染色后,用光鏡觀察其結(jié)構(gòu)改變。結(jié)果在本實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi),PDT殺傷銅綠假單胞菌的作用呈光敏劑濃度依賴(lài)性。以10和25μM Ru-PDT處理PAO1浮游菌和生物被膜均能夠顯著殺傷,浮游菌殺傷分別達(dá)到99.99%和99.9999%以上,生物被膜內(nèi)菌的殺傷分別為60.1%和66.0%,進(jìn)一步提高光敏劑濃度至50μM,光動(dòng)力作用沒(méi)有顯著增強(qiáng)。單純照光或光敏劑孵育對(duì)細(xì)菌存活無(wú)影響。光鏡觀察PDT處理組生物被膜發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)完整性遭到破壞,整體稀疏分散。結(jié)論 Ru-PDT在體外對(duì)銅綠假單胞菌浮游菌和生物被膜內(nèi)細(xì)菌都具有很好的殺傷作用;浮游菌相比生物被膜內(nèi)的細(xì)菌對(duì)PDT作用更加敏感。PDT不僅可以使生物被膜內(nèi)細(xì)菌失去活性,還可以破壞其結(jié)構(gòu),具有清除作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of photodynamic therapy (PDT) mediated by Ru complex, a new Guang Min agent, on the activity of phytoplankton bacteria and biofilm bacteria of Pseudomonas aeruginosa (PAO1), and to observe the scavenging effect of PDT on the biofilm of Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa). Methods the models of bacterial suspension and biofilm were divided into four groups. The concentration of Guang Min in the bacterial suspension group was 0.1a 0.25U 2.5U 10 and 25 渭 m, and the concentration of Guang Min in the biofilm group was 1g 2.5g 10 and 25 渭 M.(1)PDT: after the addition of different concentrations of Guang Min, the incubation time was 30 min, and the irradiation time was 30 min, and the concentration of Guang Min in the biofilm group was 30 min. Power density was 40 MW / cm ~ 2, irradiation time was 10 min 路min ~ (2) Guang Min group: Guang Min incubated for 30 min, no laser irradiation. 3) irradiation group: laser irradiation only, power density 40 MW / cm ~ (2), irradiation time 10 min 路min. 4) blank control group: no addition of Guang Min. No laser irradiation. The survival rate of phytoplankton and the activity of bacteria in biofilm were determined by dilution plate method and MTT method respectively. The biofilm was washed, fixed and stained with crystal violet. Results the killing effect of PDT on Pseudomonas aeruginosa was concentration dependent on Guang Min. When treated with 10 and 25 渭 M Ru-PDT, both PAO1 phytoplankton bacteria and biofilm could kill significantly, and the killing rate of phytoplankton bacteria was more than 99.99% and 99.9999%, respectively. The killing rate of biofilm bacteria was 60.1% and 66.0% respectively. The photodynamic effect was not significantly enhanced when the concentration of Guang Min was increased to 50 渭 m. The survival of bacteria was not affected by irradiation or Guang Min alone. Under light microscope, the biofilm of PDT treatment group was found to be damaged in structural integrity and sparse and dispersed as a whole. Conclusion Ru-PDT can kill Pseudomonas aeruginosa phytoplankton bacteria and biofilm bacteria in vitro, and that phytoplankton bacteria are more sensitive to PDT than biofilm bacteria. It can also destroy its structure and has the function of cleaning.
【作者單位】: 解放軍總醫(yī)院激光醫(yī)學(xué)科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81171633) 北京市自然科學(xué)基金(4132079)
【分類(lèi)號(hào)】:R378

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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3 王s,

本文編號(hào):1973484


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