本文選題：間充質(zhì)干細(xì)胞 + 人骨髓��； 參考：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2005年博士論文

【摘要】：人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)是骨髓中的一類與造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cells,HSCs)不同的,具有向骨、軟骨、脂肪、肌肉等多種組織細(xì)胞分化能力的成體干細(xì)胞,它在體外可以大量增殖,并具有克隆形成的能力。它就是人們很早就知道的骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)。由于其具有多向分化的潛能,在體外又較容易培養(yǎng)擴(kuò)增,加之具有潛在的細(xì)胞治療價(jià)值,故引起了生物學(xué)界和醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。 然而,相對(duì)于HSCs來說,人們對(duì)MSCs生物學(xué)特性的認(rèn)識(shí)要滯后得多,就連其表型特征和分化潛能的認(rèn)識(shí)也尚不一致。造成這種情況的主要原因可能有:1)個(gè)體發(fā)育的不同階段,MSCs的表型和功能有差異;2)骨髓中存在不同分化等級(jí)的MSCs;3)骨髓中不同空間位置的MSCs存在差異;4)不同實(shí)驗(yàn)室分離MSCs的方法不同,分離后體外培養(yǎng)的條件也不一樣,以致所獲得的MSCs也不同;5)用于研究MSCs分化潛能的體外誘導(dǎo)和體內(nèi)移植的體系不一致。因此,MSCs迄今尚無公認(rèn)的、高度特異性的分子標(biāo)記,也沒有較為標(biāo)準(zhǔn)的分離和培養(yǎng)方法。Friedenste AJ(1970)和Gronthos S(2003)等人的研究發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)的單個(gè)骨髓基質(zhì)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)后可以形成克隆,稱為集落形成成纖維樣細(xì)胞(clonogenic precursors,或colony-forming fibroblastic units,CFU-F),一般所說的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞很可能就是其中的某種或某些類型的細(xì)胞群體。 基于這樣一個(gè)研究背景,本課題試圖直接從人骨髓中分離較為原始的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,以期對(duì)MSCs的基本生物學(xué)特性能夠有一個(gè)比較全面的認(rèn)識(shí)。本文的目的在于:1)建立克隆化的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞系,并建立適合其生長(zhǎng)和增殖的體外培養(yǎng)條件;2)鑒定它的基本生物學(xué)特性;3)研究其向外胚層神經(jīng)細(xì)胞和內(nèi)胚層肝臟細(xì)胞分化的潛能。 本實(shí)驗(yàn)以年齡為17y-65y的正常人骨髓為材料,利用hMSCs貼壁生長(zhǎng)和具集落形成能力的特點(diǎn),得到了多個(gè)克隆化的細(xì)胞系。對(duì)其中的一個(gè)可穩(wěn)定傳代的細(xì)胞系(hMSCs-2002-3)的基本生物學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,探討了骨髓hMSCs在體內(nèi)和體外的分化潛能,以及其在損傷肝和神經(jīng)系統(tǒng)中的植入和分化命運(yùn)。所獲得的主要結(jié)果如下: (1)hMSCs-2002-3具有間充質(zhì)干細(xì)胞基本的生物學(xué)特性。選取骨髓細(xì)胞原代培養(yǎng)物
[Abstract]:Human bone marrow mesenchymal stem cells (mesenchymal stem cells) are different from hematopoietic stem cells (HSCs) in bone marrow. They have the ability to differentiate into bone, cartilage, fat, muscle and so on. They can proliferate a lot in vitro. And has the ability of clone formation. It is the bone marrow stromal cells known as bone marrow stromal cells and BMSCs. Because it has the potential of multidirectional differentiation, it is easy to be cultured and amplified in vitro, and has the potential value of cell therapy, it has attracted the attention of biology and medicine. However, the understanding of biological characteristics of MSCs is much slower than that of HSCs, and even the understanding of phenotypic characteristics and differentiation potential of MSCs is not consistent. The main reasons for this may be: (1) phenotypic and functional differences in different stages of ontogeny (2) different differentiation grades of MSCs in bone marrow; (4) different laboratory scores of MSCs with different spatial positions in bone marrow Different from MSCs, The culture conditions were different after isolation, so that the MSCs obtained was different from the system used to study the differentiation potential of MSCs in vitro and in vivo. So far, there is no recognized and highly specific molecular marker, and there is no standard method of isolation and culture. Friedenste AJ (1970) and Gronthos Schi2003). It was found that a single bone marrow stromal cell cultured in vitro could form clone after adherent growth. The bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs), known as colony forming fibroblast cells, or colony-forming fibroblastic unitsCF-FU cells, may be one or some of these cell populations. Based on this background, we try to isolate the primitive bone marrow mesenchymal stem cells directly from human bone marrow in order to have a comprehensive understanding of the basic biological characteristics of MSCs. The purpose of this paper is to establish a cloned human bone marrow mesenchymal stem cell line. Its basic biological characteristics were identified. (3) the potential of its differentiation into ectodermal nerve cells and endoderm liver cells was studied. In this study, a number of cloned cell lines were obtained from normal human bone marrow of age 17y-65y, using the characteristics of hMSCs adherent growth and colony forming ability. The basic biological characteristics of one of the stable passaged cell lines hMSCs-2002-3 were systematically studied. The differentiation potential of bone marrow hMSCs in vivo and in vitro and its fate of implantation and differentiation in injured liver and nervous system were discussed. The main results obtained are as follows: HMSCs-2002-3 has the basic biological characteristics of mesenchymal stem cells. Selection of primary culture of bone marrow cells
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R329.2

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本文編號(hào)：1964000