本文選題：G蛋白偶聯(lián)受體 + 胼胝體��； 參考：《中國病理生理雜志》2014年03期

【摘要】：目的:探討G蛋白偶聯(lián)受體56(GPR56)基因敲除對小鼠腦胼胝體內(nèi)軸突髓鞘化和少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(OPCs)成熟的影響。方法:篩選出GPR56基因雜合型(GPR56+/-)和敲除型(GPR56-/-)小鼠36只,分為GPR56+/-和GPR56-/-組,每組18只。每組根據(jù)小鼠出生后時間分為出生后7 d(P7)、14 d(P14)、21 d(P21)和28d(P28)4個亞組。應(yīng)用FluoroMyelin染色觀察P14、P21和P28 GPR56+/-和GPR56-/-小鼠腦胼胝體內(nèi)髓鞘形成。用電鏡觀察P28 GPR56+/-和GPR56-/-小鼠胼胝體內(nèi)軸突髓鞘化,比較髓鞘的厚度。用熒光免疫組化染色觀察P7GPR56+/-和GPR56-/-小鼠胼胝體內(nèi)血小板源性生長因子α受體陽性(PDGF-αR+)細(xì)胞(即OPCs)的數(shù)量。用原位雜交監(jiān)測P28 GPR56+/-和GPR56-/-小鼠胼胝體內(nèi)髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白陽性(PLP+)細(xì)胞數(shù)。用出生后1 d的GPR56+/-和GPR56-/-小鼠腦皮質(zhì)做體外OPCs培養(yǎng)并誘導(dǎo)其分化成熟,觀察pro-oligodendroblast、immature oligodendrocyte和mature oligodendrocyte階段O4+細(xì)胞百分比。結(jié)果:與GPR56+/-小鼠比較,在P14、P21和P28GPR56-/-小鼠腦胼胝體中髓鞘的形成明顯減少。電鏡見P28 GPR56-/-小鼠腦胼胝體內(nèi)髓鞘化軸突的數(shù)量明顯減少,髓鞘g-ratio值變大,髓鞘厚度變薄。熒光免疫組化和原位雜交結(jié)果顯示P7 GPR56+/-和GPR56-/-小鼠胼胝體內(nèi)PDGF-aR+細(xì)胞數(shù)量無差異,但P28 GPR56+/-小鼠胼胝體內(nèi)PLP+細(xì)胞數(shù)明顯多于P28 GPR56-/-小鼠。體外細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示在pro-oligodendroblast階段GPR56-/-O4+細(xì)胞百分比明顯多于GPR56+/-O4+細(xì)胞,在immature oligodendrocyte和mature oligodendrocyte階段GPR56-/-O4+細(xì)胞百分比明顯少于GPR56+/-O4+細(xì)胞。結(jié)論:GPR56蛋白可能參與了腦白質(zhì)軸突髓鞘化和OPCs的成熟。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of G protein-coupled receptor 56 (GPR56) knockout on axonal myelination and oligodendrocyte precursor cell maturation in the corpus callosum of mice. Methods: a total of 36 GPR56 gene heterozygous (GPR56 / -) and knockout GPR56 /-(-) mice were selected and divided into GPR56 / R and GPR56-r- groups with 18 in each group. Each group was divided into 4 subgroups according to the postnatal time: P7, P7, P14, P14, P21, and P28, respectively. FluoroMyelin staining was used to observe the formation of myelin in the corpus callosum of P14 P21 and P28 GPR56 r-and GPR56-r- mice. The myelination of axons in the corpus callosum of P28 GPR56 r- and GPR56-r- mice was observed by electron microscope and the thickness of myelin sheath was compared. The number of platelet-derived growth factor 偽 receptor positive PDGF- 偽 R cells in the corpus callosum of P7GPR56 r- and GPR56-r- mice was observed by fluorescence immunohistochemical staining. In situ hybridization was used to monitor the number of myelin lipid protein positive cells in the corpus callosum of P28 GPR56 r- and GPR56-r- mice. In vitro OPCs culture and differentiation and maturation were conducted in the cerebral cortex of GPR56 / and GPR 56-r- mice on day 1 after birth. The percentage of O4 cells in pro-oligodendroblastus immature oligodendrocyte and mature oligodendrocyte stage was observed. Results: compared with GPR56 r-mice, the formation of myelin sheath in the corpus callosum of P14 P21 and P28 GPR56-/-mice was significantly decreased. Electron microscope showed that the number of myelinated axons in the corpus callosum of P28 GPR56-r- mice decreased significantly, the g-ratio value of myelin sheath became larger and the thickness of myelin sheath became thinner. The results of fluorescence immunohistochemistry and in situ hybridization showed that there was no difference in the number of PDGF-aR cells in the corpus callosum between P7 GPR56 r- and GPR56-r- mice, but the number of PLP cells in the corpus callosum of P28 GPR56 /-mice was significantly higher than that of P28 GPR56-r- mice. The results of cell culture in vitro showed that the percentage of GPR56-/-O4 cells at pro-oligodendroblast stage was significantly higher than that of GPR56 / O4 cells, and the percentage of GPR56-/-O4 cells at immature oligodendrocyte and mature oligodendrocyte stage was significantly lower than that of GPR56 / O4 cells. Conclusion the protein of GPR56 may be involved in myelinization of white matter and maturation of OPCs.
【作者單位】： 廣東省人民醫(yī)院 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院急危重癥醫(yī)學(xué)部;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81271329)
【分類號】：R363

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1940457