發(fā)布時間：2018-05-21 04:09

  本文選題：丙肝病毒表位抗原 + 乙肝病毒核心抗原　； 參考：《吉林大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 本研究為丙肝核酸疫苗的基礎(chǔ)性研究工作。應(yīng)用重疊延伸PCR技術(shù),獲得了HCV復(fù)合多表位抗原與HBV核心抗原(HBcAg)的融合基因,命名為CMCe。實驗進(jìn)行過程中,設(shè)立HBc基因(C基因)平行對照組。將CMCe定向克隆于pET-28a(+)原核表達(dá)載體,構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒pET-28a(+)-CMCe,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞中,測序正確后篩選陽性克隆,轉(zhuǎn)化至BL21(DE3)宿主菌中,利用IPTG誘導(dǎo)目的基因在大腸桿菌中表達(dá)。經(jīng)過western blot分析后,表達(dá)產(chǎn)物能與慢性丙型肝炎病人血清中的抗體發(fā)生特異性的抗原-抗體反應(yīng)。表明融合基因所表達(dá)的蛋白有良好的免疫原性。
[Abstract]:This study is the basic research work of hepatitis C nucleic acid vaccine. The fusion gene of HCV complex polyepitope antigen and HBV core antigen HBcAgwas obtained by overlapping extension PCR technique and named CMCe. During the course of the experiment, HBc gene C gene was set up in parallel control group. CMCe was cloned into pET-28a () prokaryotic expression vector, and the expression plasmid pET-28a (pET-28a) was transformed into Escherichia coli DH5 偽 competent cells. IPTG was used to induce the expression of the target gene in Escherichia coli. After western blot analysis, the expressed product could react with antibody in serum of patients with chronic hepatitis C. The results showed that the protein expressed by the fusion gene had good immunogenicity.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R392;Q78

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1917670