本文選題：Rho激酶 + 突起�。� 參考：《暨南大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】：目的：探討Rho激酶通路對神經(jīng)元突起生長和微管重排的調(diào)節(jié)。材料和方法：以大鼠海馬神經(jīng)元為對象，用Rho激酶促進劑LPA和Rho激酶抑制劑Y27632干預(yù)，原子力顯微鏡觀察細(xì)胞突起的生長，并提取突起進行定量分析，共聚焦激光掃描顯微鏡觀察微管的重排。結(jié)果：(1)neurobasal無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得的神經(jīng)元純度較高，且活力旺盛，貼壁后6-11d的細(xì)胞適宜實驗觀察。(2)原子力顯微鏡的觀察：LPA處理組神經(jīng)元突起的數(shù)量減少，1-3級突起的數(shù)目均減少明顯(P＜0.05)；LPA預(yù)處理后再用Y27632進行干預(yù)，一級突起的數(shù)目明顯增多，其中二級突起增多明顯(P＜0.05)；提取突起的光密度測定顯示，LPA處理后的細(xì)胞明顯降低(P＜0.05)，LPA預(yù)處理后用Y27632干預(yù)組的細(xì)胞較LPA組明顯升高(P＜0.05)，而且超過對照組水平，但無顯著差異。(3)共聚焦激光掃描顯微鏡觀察：神經(jīng)元胞體、突起和生長錐均有清晰的微管。LPA處理組的神經(jīng)元胞體內(nèi)無清晰可見呈鳥巢樣外觀的絲網(wǎng)狀微管結(jié)構(gòu)，取而代之的是不規(guī)則的微管樣結(jié)構(gòu)；突起較短，而且突起遠(yuǎn)端的熒光較淡，突起內(nèi)微管的排列出現(xiàn)發(fā)辮樣改變；生長錐失去原有的典型的生長錐樣結(jié)構(gòu)，僅見突起細(xì)小的末端，其中的微管大部分消失。LPA預(yù)處理后用Y27632干預(yù)組的神經(jīng)元胞體內(nèi)可見較清晰的絲網(wǎng)狀微管結(jié)構(gòu)，微管深入細(xì)胞的突起；突起內(nèi)的微管仍可見較大的空隙，但明顯較LPA組排列規(guī)整；突起末端生長錐基本保持了原有的形態(tài)，其中可見較清晰的微管，，它們直行深入生長錐或者彎曲走行。結(jié)論：(1)從新生大鼠大腦可成功分離獲得大量海馬神經(jīng)元，在neurobasal無血清培養(yǎng)基中生長良好。(2)激活Rho激酶通路可誘導(dǎo)神經(jīng)元突起坍塌，表現(xiàn)在各級突起數(shù)目的減少和長度的縮短，抑制Rho激酶通路可促使神經(jīng)元突起各級分支數(shù)目的增加以及突起的生長。(3)Rho激酶不但通過調(diào)節(jié)微管重排參與突起的生長延長，還參與突起的分支形成，抑制Rho激酶的活性基本能逆轉(zhuǎn)LPA對突起生長的坍塌作用，但并不能完全逆轉(zhuǎn)LPA誘導(dǎo)的微管重排。
[Abstract]:Objective: to investigate the regulation of Rho kinase pathway on neurite growth and microtubule rearrangement. Materials and methods: rat hippocampal neurons were treated with Rho kinase enhancer LPA and Rho kinase inhibitor Y27632. The neurites were observed by atomic force microscope and the processes were extracted for quantitative analysis. The rearrangement of microtubules was observed by confocal laser scanning microscope. Results the neurons cultured in serum-free medium were of high purity and high activity. The number of neuronal processes in the treatment group decreased significantly (P < 0.05) after pretreatment with Y27632, and the number of first-order protrusions increased significantly, and the number of neuronal processes decreased significantly after pretreatment with Y27632 (P < 0.05), and the number of neuronal processes decreased significantly after treatment with LPA (P < 0.05), and Y27632 was used in the treatment group. The number of secondary processes increased significantly (P < 0.05), and the optical density of the extracted processes showed that the cells treated with LPA-treated with Y27632 were significantly lower than those in the LPA group (P < 0.05), and the level of cells in the treatment group was higher than that in the control group, and the number of cells in the treatment group was significantly higher than that in the control group, and that in the treatment group with Y27632 was significantly higher than that in the LPA group. But there was no significant difference. (3) Confocal laser scanning microscopy showed that there were no clear filamentous microtubules in the neuronal bodies, processes and growth cones in the LPA treated group, and there were no clear filamentous microtubules in the neuronal bodies with the appearance of bird's nest. Instead of the irregular tubule-like structure, the protrusions are shorter, and the fluorescence at the distal end of the protuberances is lighter, and the arrangement of the microtubules in the protuberances changes like braided; the growth cones lose their original typical growth cone-like structures and only see the small ends of the protuberances. Most of the microtubules disappeared. After pretreatment with Y27632, clear filamentous microtubule structure was found in the neurons of Y27632 intervention group, and the microtubules in the process could still be seen larger voids, but the arrangement of the microtubules was more regular than that in the LPA group. The shape of the growth cone at the end of the protuberance is basically the same, and the clear microtubules can be seen, which go directly into the growth cone or bend. Conclusion: 1) A large number of hippocampal neurons were successfully isolated from the brain of newborn rats. The neurons grew well in neurobasal serum-free medium. The activation of Rho kinase pathway could induce neuronal neurites to collapse, which was manifested by the reduction of the number of processes and the shortening of length. Inhibition of Rho kinase pathway can promote the increase of the number of branches of neuronal processes and the growth of protrusions. Rho kinases not only participate in the extension of processes by regulating microtubule rearrangement, but also participate in the formation of branches of processes. Inhibition of the activity of Rho kinase could reverse the collapse of LPA on the growth of process, but it could not completely reverse the microtubule rearrangement induced by LPA.
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R329

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳利云;羅冬嬌;童夏生;阮正英;王恩智;陳豪;;葛根素對Rho激酶在大鼠心肌缺血-再灌注損傷中作用的影響[J];醫(yī)藥導(dǎo)報;2011年07期

2 陳培芬;羅雅玲;賴文巖;邢曉雯;駱子義;邱智輝;;巨噬細(xì)胞移動抑制因子經(jīng)Rho途徑促進人肺成纖維細(xì)胞Ⅲ型膠原合成[J];中國病理生理雜志;2011年06期

3 鄭丹;梁躍進;毛雯倩;李冉;王勇;;鹽酸法舒地爾抗日本血吸蟲感染小鼠肝纖維化的作用[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2011年03期

4 李通;田紅英;鄧艷;蘇達(dá)京;何寧宇;;鹽酸法舒地爾對腦梗死患者的療效及對血清中IL-1β、TNF-α和RHO激酶影響的觀察[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2011年08期

5 鄭惠珍;趙靜;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的內(nèi)皮樣細(xì)胞促進血管新生及Rho激酶的作用[J];生理學(xué)報;2011年04期

6 李津軍;;畸形食物吃不得[J];食品與健康;2000年02期

7 祁璐璐;韓澤民;;第二前磨牙畸形中央尖導(dǎo)致根尖重度感染伴根尖吸收1例[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年08期

8 亢曉冬;梁國慶;沈禮;孫霞;;水囊壓迫大鼠腦組織致星形膠質(zhì)細(xì)胞中膠質(zhì)纖維酸性蛋白的變化[J];健康研究;2011年03期

9 曹水良;宋元宗;王自能;郭祖文;唐福星;;一例Citrin缺陷病患兒棘形紅細(xì)胞的掃描電鏡觀察[J];電子顯微學(xué)報;2011年03期

10 鄧?yán)?代榮陽;廖彥生;高小青;楊朝鮮;;新生大鼠皮層神經(jīng)元的培養(yǎng)與鑒定[J];西南軍醫(yī);2011年04期

相關(guān)會議論文 前3條

1 陳茂華;孫軍;陸川;陳獻(xiàn)東;蔡建勇;巴華君;林建虎;何學(xué)雄;;蛛網(wǎng)膜下腔出血后RHO激酶對腦血管痙攣的調(diào)控研究[A];2009年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

2 黃琳;郭蓮軍;李玉珍;;鹽酸法舒地爾對大鼠慢性低灌性腦缺血所致學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用[A];2008年中國藥學(xué)會學(xué)術(shù)年會暨第八屆中國藥師周論文集[C];2008年

3 方蓮花;宮麗麗;呂揚;杜冠華;;J7028的舒張血管作用及其機制[A];中國藥理學(xué)會第十次全國學(xué)術(shù)會議專刊[C];2009年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 嚴(yán)冰;品種突起異軍 產(chǎn)業(yè)趨于集中[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

2 粟嬋 阿龍;江蘇糧食行業(yè)龍型經(jīng)濟突起[N];糧油市場報;2002年

3 史芳;飲料市場“茶”軍突起[N];中國信息報;2000年

4 省政協(xié)委員、本報記者 來永祥;文化“浙軍”怎樣突起[N];浙江日報;2002年

5 記者 王昊;巴內(nèi)部突起爭端[N];新華每日電訊;2002年

6 張傳嶺;黃金市場風(fēng)云突起[N];中國財經(jīng)報;2002年

7 吳冬梅;顯示器市場新軍突起[N];中國鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)報;2002年

8 中華工商時報記者 周勇剛 王洪浩;零售業(yè)身處裂變前夜 連鎖經(jīng)營異軍猛突起[N];福建工商時報;2001年

9 本報見習(xí)記者 黃靜;健康產(chǎn)業(yè)突起“航天軍”[N];人民政協(xié)報;2002年

10 銀河證券研究中心 李志剛;擴容風(fēng)云突起 大盤短期整理[N];華夏時報;2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 苗志林;Rho激酶在炎癥因子誘導(dǎo)的小型豬冠狀動脈狹窄病變的表達(dá)及雷帕霉素干預(yù)的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

2 關(guān)啟剛;炎癥因子介導(dǎo)的小型豬冠狀動脈痙攣Rho激酶的作用機制與通心絡(luò)干預(yù)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

3 楊莉;Rho激酶在低氧大鼠肺小動脈的表達(dá)及燈盞花素預(yù)防作用的研究[D];四川大學(xué);2006年

4 孫廣萍;Rho激酶在醛固酮腎臟損傷中的作用[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

5 陳雪彥;間尼索地平對野百合堿誘導(dǎo)的肺動脈高壓的防治作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

6 劉翠清;Rho激酶和磷酸二酯酶對環(huán)核苷酸依賴性血管舒張作用的調(diào)節(jié)[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

7 郭曉華;Moesin蛋白磷酸化在晚期糖基化終產(chǎn)物介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞反應(yīng)中的作用及機制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

8 郭國慶;Rho激酶通路對大鼠海馬神經(jīng)元突起生長和微管重排的調(diào)節(jié)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2007年

9 李濤;Rho激酶對休克血管反應(yīng)性的調(diào)節(jié)作用及其機制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

10 張騫;阿托伐他汀改善骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性心肌梗死療效的機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 陳靜;Rho激酶調(diào)節(jié)大鼠海馬神經(jīng)元突起生長和微管重排的研究[D];暨南大學(xué);2007年

2 裴麗麗;巨噬細(xì)胞移動抑制因子在動脈粥樣硬化中的作用及機制[D];吉林大學(xué);2009年

3 王博;腦源性神經(jīng)生長因子（BDNF）對胎鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

4 皇甫蓓蓓;Rho/Rho激酶信號通路在實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎發(fā)生機制中的作用研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2009年

5 賈卓敏;Rho激酶與大鼠逼尿肌不穩(wěn)定的關(guān)系研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 翟志永;強制性運動療法對大鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)修復(fù)及Rho激酶表達(dá)的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

7 盧春茂;Rho激酶對離體大鼠缺血再灌注損傷心臟功能的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

8 李陽;Rho激酶在腸缺血再灌注肺損傷中的作用及法舒地兒預(yù)處理的保護研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2009年

9 辛莉;CRMP-1-phrGFP II-N真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其對突起生長的調(diào)節(jié)[D];暨南大學(xué);2007年

10 胡曉薇;Rho激酶在大鼠腸缺血再灌注肝腸損傷中的作用及法舒地爾預(yù)處理對其的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號：1862790