本文選題：金黃色葡萄球菌 + RNA��； 參考：《浙江大學(xué)》2006年碩士論文

【摘要】：目的 構(gòu)建金黃色葡萄球菌RNAⅢ激活蛋白(RNAⅢ-activating protein,RAP)重組蛋白表達(dá)載體RAP-pQE30,誘導(dǎo)其在大腸桿菌SG13009內(nèi)表達(dá),制取重組蛋白并進(jìn)行純化,同時(shí)檢測(cè)其體內(nèi)活性。 方法 經(jīng)PCR從金黃色葡萄球菌基因組中克隆出編碼RAP蛋白的基因,轉(zhuǎn)化TG_1菌株,提取質(zhì)粒后測(cè)序;隨后構(gòu)建RAP-pQE30重組蛋白表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株SG13009,用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白,而后用6×His Ni-NTA親和柱純化RAP蛋白。將純化的蛋白作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行皮下注射,再用金黃色葡萄球菌感染小鼠,觀察RAP蛋白是否有預(yù)防金黃色葡萄球菌感染的作用。 結(jié)果 在經(jīng)IPTG誘導(dǎo)的RAP-pQE30/SG13009全菌蛋白中檢測(cè)到相對(duì)分子量大小約為40KD的RAP重組蛋白,經(jīng)純化后明顯。將注射純化RAP蛋白組小鼠和對(duì)照組小鼠比較,發(fā)現(xiàn)注射RAP組小鼠感染的發(fā)生率小、感染的損傷程度輕。 結(jié)論 成功表達(dá)并純化了RAP蛋白,且證實(shí)它有預(yù)防金黃色葡萄球菌感染的作用,可望成為金黃色葡萄球菌疫苗。
[Abstract]:Objective to construct the recombinant protein expression vector RAP-pQE30 of staphylococcus aureus RNA 鈪，

本文編號(hào)：1855990