本文選題：骨骼肌 + 缺血-再灌注損傷��； 參考：《中南大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 背景和目的缺血組織在恢復(fù)血流后出現(xiàn)的更為嚴(yán)重的損傷稱之為缺血再灌注損傷(ischemic reperfusion，I／R)。缺血再灌注損傷在急診外科常見，嚴(yán)重影響患者的功能恢復(fù)，甚至造成殘疾或死亡。良好的血液循環(huán)使組織細(xì)胞獲得充足的氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)并排出代謝產(chǎn)物，各種原因造成血液供給中斷，灌注量減少，都會(huì)引起組織和細(xì)胞的缺血性損傷，其機(jī)制十分復(fù)雜。近年來發(fā)現(xiàn)：它是一個(gè)多因素參與，多機(jī)制損傷的過程，普遍認(rèn)為：白細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，能量代謝障礙，氧自由基，鈣超載在其發(fā)生過程中起關(guān)鍵作用。本研究旨在討論鈣釋放通道蘭尼定受體-1(ryanodine receptors 1，RyR_1)在骨骼肌缺血再灌注損傷中的表達(dá)及其意義，為闡明其在鈣超載中的作用做初步研究。 材料和方法健康雄性SD大鼠隨機(jī)分組，建立后肢骨骼肌缺血再灌注損傷(skeletal muscle ischemia reperfusion injury，SMIRI)動(dòng)物模型，，運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)大鼠骨骼肌細(xì)胞RyR_1mRNA的表達(dá)，運(yùn)用軟件分析其相對(duì)濃度。運(yùn)用比色法測(cè)定血清丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化歧化酶(SOD)、髓過氧化物酶(MPO)水平，骨骼肌細(xì)胞中丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)、髓過氧化物酶(MPO)，以及濕重／干重(W／D)比例反映骨骼肌水腫程度，光鏡觀察骨骼肌結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果骨骼肌缺血再灌注導(dǎo)致RyRImRNA表達(dá)在再灌注兩小時(shí)增強(qiáng)，而后明顯降低(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。骨骼肌缺血再灌注導(dǎo)致MDA、NO、MPO以及濕重／干重比值明顯升高，SOD降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論本研究首先應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)SMIRI時(shí)RyR_1mRNA的表達(dá)，有助于進(jìn)一步闡明SMIRI的發(fā)生機(jī)制。骨骼肌在缺血再灌注后由于多種機(jī)制參與，導(dǎo)致骨骼肌細(xì)胞RyR_1蛋白表達(dá)異常，細(xì)胞內(nèi)鈣超載，加上組織缺血時(shí)產(chǎn)生的自由基，共同對(duì)肢體骨骼肌組織造成一定的損害，為尋找防治SMIRI開辟一條可行性方法奠定了初步基礎(chǔ)。
[Abstract]:Background and objective the more serious injury of ischemic tissue after recovery of blood flow is called ischemic reperfusion injury. Ischemia-reperfusion injury is common in emergency surgery, which seriously affects the functional recovery of patients and even results in disability or death. Good blood circulation can make the tissue and cells get sufficient oxygen and nutrients supply and excrete the metabolites. All kinds of reasons lead to the interruption of blood supply and the decrease of perfusion which will cause ischemic injury of tissues and cells. The mechanism is very complex. In recent years, it has been found that it is a multi-factor and multi-mechanism process of injury. It is generally believed that leukocyte mediated inflammation, energy metabolism disorders, oxygen free radicals and calcium overload play a key role in the process of its occurrence. The purpose of this study was to investigate the expression and significance of the calcium release channel Lainidine receptors 1 RyR1 in skeletal muscle ischemia-reperfusion injury, and to elucidate its role in calcium overload. Materials and methods healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups to establish an animal model of skeletal muscle ischemia / reperfusion injury. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the expression of RyR_1mRNA in skeletal muscle cells of rats. The relative concentration was analyzed by software. The serum levels of malondialdehyde (MDA), nitric oxide (no), superoxide dismutase (SOD) and myeloperoxidase (MPO) were measured by colorimetry. The ratio of malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), myeloperoxidase (MPO) and wet / dry weight (W / D) in skeletal muscle cells reflected the degree of skeletal muscle edema. The changes of skeletal muscle structure were observed under light microscope. Results the expression of RyRImRNA increased after reperfusion for two hours and then decreased significantly (P < 0.05). MDA-NON-MPO and wet / dry weight ratio increased and SOD decreased significantly (P < 0.05) after ischemia and reperfusion of skeletal muscle. Conclusion in this study, the expression of RyR_1mRNA in SMIRI was detected by RT-PCR method, which was helpful to elucidate the pathogenesis of SMIRI. After ischemia / reperfusion, skeletal muscle has been involved in many mechanisms, which lead to abnormal expression of RyR_1 protein in skeletal muscle cells, intracellular calcium overload, and free radicals produced by tissue ischemia, which cause certain damage to skeletal muscle tissue of limbs. It lays a preliminary foundation for finding a feasible method to prevent and cure SMIRI.
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：1855075