本文選題：成體表皮干細胞 + 細胞培養(yǎng)�。� 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2006年碩士論文

【摘要】：目的 1、熟練掌握體外成體表皮干細胞與成熟表皮細胞的分離、培養(yǎng)及其鑒定。初步地研究其生物學(xué)特性。 2、研究誘導(dǎo)因素對成體表皮細胞的分化影響。 3、采用皮片移植模型，來探討成熟表皮細胞向干細胞逆向分化的可能性。 方法 (取標本時，已征得患者本人同意。) 1、通過dispase Ⅱ酶消化成人包皮，采用差速黏附法，分別獲得ESC及成熟表皮細胞，利用MTT比色法和細胞計數(shù)法來觀察細胞的增殖傳代情況；利用免疫組化觀察ESC及成熟表皮細胞的角蛋白表達差異；初步研究其生物學(xué)特性。 2、將體外培養(yǎng)的成熟的表皮細胞，添加EGF、血清、表皮干培養(yǎng)基等多種誘導(dǎo)因子，通過顯微鏡觀察、細胞流式等檢測皮膚表面標志物(角蛋白)不同表達，應(yīng)用TRAP法檢測端粒酶活性的變化來分析細胞的分化狀況；同時通過導(dǎo)入hTERT來獲得永生化的成體表皮干細胞。 3、通過用DAPI標記的超薄刃厚皮片移植至全層皮膚缺損的裸鼠創(chuàng)面，分別于第3、5、7天取材，，制作冰凍切片，行免疫組化染色，在雙熒光顯微鏡下觀察成熟表皮細胞逆向分化現(xiàn)象的存在。
[Abstract]:Purpose 1. Master the isolation, culture and identification of adult epidermal stem cells and mature epidermal cells in vitro. Its biological characteristics were preliminarily studied. 2. To study the effect of inducing factors on the differentiation of adult epidermal cells. 3. The possibility of reverse differentiation of mature epidermal cells into stem cells was studied by skin graft model. Method (with the patient's consent.) 1. Adult prepuce was digested by dispase 鈪

本文編號：1850358