抗結(jié)腸腫瘤相關(guān)抗原單克隆抗體的制備及鑒定
本文選題:腫瘤相關(guān)抗原 + 單克隆抗體; 參考:《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2005年03期
【摘要】:目的:制備抗結(jié)腸腫瘤相關(guān)抗原的單克隆抗體(mAb)并對其進(jìn)行初步的鑒定及功能研究。方法:將結(jié)腸癌細(xì)胞系或磨碎的結(jié)腸癌組織免疫小鼠,按常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)胞融合,采用活細(xì)胞周圍花環(huán)形成的方法進(jìn)行陽性克隆的篩選。用間接免疫熒光染色和流式細(xì)胞術(shù)分析及酶免疫組織化學(xué)的方法進(jìn)行初步鑒定,并用抗體介導(dǎo)的補體依賴的細(xì)胞毒試驗(CDC)進(jìn)行初步的功能研究。結(jié)果:獲得了2株分泌抗結(jié)腸腫瘤相關(guān)抗原mAb雜交瘤細(xì)胞株3A12和6A8。流式細(xì)胞儀檢測,2株雜交瘤分泌的抗體均能在結(jié)腸癌細(xì)胞系中均為陽性。普通石蠟切片及組織芯片的免疫酶組織化學(xué)染色結(jié)果,顯示2株mAb均在結(jié)腸腫瘤組織中有較高的陽性率。2株mAb分別與靶細(xì)胞及補體
[Abstract]:Objective: to prepare a monoclonal antibody against colonic tumor related antigen (mAb) and to make a preliminary identification and functional study. Method: immunize mice with colon cancer cell lines or grated colon cancer tissue to perform cell fusion according to conventional methods. The indirect immunofluorescence was used to screen the positive clones by using the ring of living cells. Preliminary identification of light staining and flow cytometry and enzyme immunohistochemistry, and preliminary functional studies using antibody mediated complement dependent cytotoxicity test (CDC). Results: 2 hybridoma cell lines secreted against colon tumor related antigen mAb, 3A12 and 6A8. flow cytometry, were detected, and 2 hybridoma secreted. The antibodies were all positive in the colon cancer cell lines. The results of immunohistochemical staining of common paraffin slices and tissue chips showed that 2 mAb strains had a high positive rate of.2 strain mAb in the colon tumor tissues and the target cells and complement respectively.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室
【基金】:ColoncancercollaborativeprogramwithCancerResearchInsti tute,NewYork,USA(國際合作項目,2002~2005年度)
【分類號】:R735.35
【參考文獻(xiàn)】
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