本文選題：惡性瘧原蟲 + 纖維狀肌動蛋白　； 參考：《同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2014年06期

【摘要】：目的通過構(gòu)建游離表達(dá)綠色熒光蛋白融合Lifeact多肽(Lifeact-GFP)的轉(zhuǎn)基因蟲株,在不影響惡性瘧原蟲actin動態(tài)平衡的前提下特異標(biāo)識纖維狀肌動蛋白(F-actin),為研究F-actin在惡性瘧原蟲中的特性及其對毒力基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用打下基礎(chǔ)。方法構(gòu)建重組轉(zhuǎn)染質(zhì)粒Lifeact-GFP/p LN,經(jīng)電轉(zhuǎn)化方法將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入惡性瘧原蟲3D7標(biāo)準(zhǔn)蟲株中,BSD藥物篩選獲得攜帶游離Lifeact-GFP/p LN質(zhì)粒的轉(zhuǎn)基因蟲株,并經(jīng)免疫印跡(Western Blot)和活細(xì)胞熒光檢測,證實(shí)Lifeact-GFP融合基因的細(xì)胞內(nèi)表達(dá),以期通過免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)(Co-IP)檢測Lifeact與惡性瘧原蟲F-actin的相互作用。結(jié)果成功獲得了惡性瘧原蟲Lifeact-GFP轉(zhuǎn)基因蟲株,并通過W estern Blot和熒光檢測證實(shí)Lifeact-GFP成功獲得表達(dá);但是,免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步顯示,Lifeact不能直接結(jié)合惡性瘧原蟲F-actin。結(jié)論雖然Lifeact多肽能在酵母等細(xì)胞中特異結(jié)合F-actin,但是不能直接識別惡性瘧原蟲F-actin。
[Abstract]:Objective to identify fibrous actin (F-actin) without affecting the dynamic balance of Plasmodium falciparum actin without affecting the dynamic balance of Plasmodium falciparum actin, and to lay a foundation for studying the specificity of F-actin in the Plasmodium falciparum and its regulatory role in the transcription of virulence genes, by constructing a transgenic insect strain expressing the free green fluorescent protein (GFP) fusion peptide (Lifeact-GFP). Methods the recombinant plasmid Lifeact-GFP/p LN was constructed, and the plasmid was transferred into the 3D7 standard strain of Plasmodium falciparum. BSD drugs were screened to obtain the transgenic plants carrying free Lifeact-GFP/p LN plasmids. The intracellular expression of the Lifeact-GFP fusion gene was confirmed by immunoblotting (Western Blot) and living cell fluorescence detection. The interaction between Lifeact and Plasmodium falciparum F-actin was detected by immunoprecipitation assay (Co-IP). Results were successfully obtained from Lifeact-GFP transgenic insect strains of Plasmodium falciparum, and the expression of Lifeact-GFP was confirmed by W estern Blot and fluorescence detection. However, the results of the immuno sedimentation experiment showed that Lifeact could not be directly combined with evil. Plasmodium falciparum F-actin. conclusion although Lifeact peptide can specifically bind F-actin in yeast cells, it can not directly identify Plasmodium falciparum F-actin..

【作者單位】： 同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【分類號】：R382.31

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1835474