Erbin蛋白在GTS-21激活膽堿能抗炎通路中的調(diào)控作用
本文選題:膽堿能抗炎通路 + Erbin。 參考:《武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2014年04期
【摘要】:目的:探討Erbin蛋白在GTS-21激活膽堿能抗炎通路抑制胞壁酰二肽(MDP)誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中的調(diào)控作用。方法:將正常培養(yǎng)的RAW264.7細(xì)胞分為4組:空白對(duì)照組(NS組),MDP組(M組):MDP(10μg/ml),GTS-21組(G組):MDP(10μg/ml)+α7nAChRs特異激動(dòng)劑/GTS-21(50μg/ml),Erbin shRNA干擾組(R組):MDP(10μg/ml)+GTS-21(50μg/ml)+Erbin shRNA。在MDP刺激后1,6,24h時(shí)間點(diǎn)提取標(biāo)本,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)10個(gè)樣本。Western檢測(cè)Erbin的表達(dá),免疫熒光檢測(cè)Erbin的免疫定位,凝膠遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA印跡)檢測(cè)NF-κB活化,ELISA檢測(cè)TNF-α、IFN-γ等促炎性細(xì)胞因子水平。結(jié)果:MDP刺激后,Erbin表達(dá)升高,NF-κB活性增強(qiáng),TNF-α、IFN-γ水平顯著增加;與M組相比,G組Erbin表達(dá)明顯升高(P0.05),NF-κB活性降低(P0.05),TNF-α、IFN-γ水平均下降(P0.05),與G組相比,R組Erbin表達(dá)明顯下降(P0.05),NF-κB活性增強(qiáng)(P0.05),TNF-α、IFN-γ水平均升高(P0.05)。結(jié)論:Erbin蛋白是激活膽堿能抗炎通路抑制MDP誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中關(guān)鍵調(diào)控蛋白,起負(fù)調(diào)控作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of Erbin protein in the inhibition of inflammatory response induced by cholinergic anti-inflammatory pathway activated by GTS-21. Methods: the normal cultured RAW264.7 cells were divided into four groups: control group (NS group), MDP group (n = 10 渭 g / ml) and group G (n = 10 渭 g / ml) 偽 7nAChRs specific agonist, -GTS-21 (50 渭 g / ml), interfering group R (n = 10 渭 g / ml) GTS-21(50) Erbin shRNA (n = 10 渭 g / ml), the control group (n = 10 渭 g / ml), the G group (n = 10 渭 g / ml) and the G group (n = 10 渭 g / ml) a specific agonist for 偽 7nAChRs. Ten samples were collected at 24 h after MDP stimulation. The expression of Erbin was detected in 10 samples at each time point. The immunoreactivity of Erbin was detected by immunofluorescence, and the level of pro-inflammatory cytokines such as TNF- 偽 -IFN- 緯 was detected by Elisa. Results the expression of Erbin increased and the activity of NF- 魏 B increased the activity of TNF- 偽-魏 B increased significantly, the expression of Erbin increased significantly in group G and the activity of P0.05- 偽 -IFN- 魏 B decreased in group G. Compared with group G, the activity of Erbin increased significantly in group B and the activity of TNF- 偽 -IFN- 緯 increased in group G. Compared with group G, the activity of NF-kappa B in group B was significantly increased and the activity of TNF- 偽 -IFN- 緯 was increased. ConclusionErbin protein is a key regulatory protein that activates cholinergic anti-inflammatory pathway and plays a negative role in inhibiting inflammatory response induced by MDP.
【作者單位】: 武漢大學(xué)中南醫(yī)院麻醉科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81101449) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(編號(hào):111058) 湖北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):2010CDB00404)
【分類號(hào)】:R392
【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1829730
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