微顆粒攜帶microRNA-126在細(xì)胞間信號傳遞中的作用
本文選題:微顆粒 + 微RNAs ; 參考:《北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2014年06期
【摘要】:目的:探討微顆粒(microparticles,MP)作為載體攜帶microRNAs(miRNAs)在介導(dǎo)細(xì)胞間信號傳遞中的作用。方法:用梯度離心的方法獲得人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和293T細(xì)胞來源的微顆粒,將微顆粒與人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞(THP-1細(xì)胞)共培養(yǎng),然后應(yīng)用transwell遷移實驗觀察THP-1細(xì)胞遷移情況;用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)及Western blotting實驗的方法,分析微顆粒攜帶miRNAs影響單核細(xì)胞遷移的機(jī)制。結(jié)果:通過transwell實驗發(fā)現(xiàn),HUVEC細(xì)胞來源的微顆粒(MPHUVEC)組THP-1細(xì)胞遷移數(shù)明顯多于293T細(xì)胞來源的微顆粒(MP293T)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);MPHUVEC組THP-1細(xì)胞CXCR4 mRNA及蛋白表達(dá)水平均明顯高于MP293T組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。HUVEC細(xì)胞分別給予lipo2000、lipo2000+miRNA inhibitor和lipo2000+miRNA-126 inhibitor不同處理獲得的微顆粒為MPcon、MPneg-con、MPmiR-126 inhibitor,與MPcon組、MPneg-con組相比,MPmiR-126 inhibitor組THP-1細(xì)胞遷移數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);MPmiR-126 inhibitor組THP-1細(xì)胞CXCR4 mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著低于MPcon組、MPneg-con組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:HUVEC細(xì)胞來源的微顆粒可以攜帶miRNA-126促進(jìn)單核細(xì)胞遷移,微顆粒作為載體可以攜帶miRNAs介導(dǎo)細(xì)胞間信號傳遞。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of microgranular MPs as a carrier carrying microRN AsmiRNs in intercellular signal transduction. Methods: human umbilical vein endothelial cells and 293T cells derived from human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) and 293T cells were obtained by gradient centrifugation and co-cultured with human acute monocytic leukemia cells (THP-1 cells). Then the migration of THP-1 cells was observed by transwell migration assay, and the mechanism of micronucleus carrying miRNAs on monocyte migration was analyzed by real-time quantitative polymerase chain reaction- PCR and Western blotting assay. Results: transwell assay showed that the number of migration of THP-1 cells in the MPHUVEC-derived group was significantly higher than that in the MP293T group, and the expression of CXCR4 mRNA and protein in the THP-1 cells in the P0.05-MPHUVEC group was significantly higher than that in the MP293T group. There were significant differences in the number of THP-1 cell migration between MPcon group and MPneg-con-lated group. The migration of THP-1 cells in the MPmiR-126 inhibitor group was significantly lower than that in the MPcon group compared with the MPcon group. The expression of CXCR4 mRNA and protein in THP-1 cells in P0.05 inhibitor group was significantly lower than that in MPneg-con group (P 0.05). Conclusion the microparticles derived from the cells can carry miRNA-126 to promote monocyte migration, and microparticles can carry miRNAs to mediate intercellular signal transduction.
【作者單位】: 北京大學(xué)人民醫(yī)院心臟中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81270274) “重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(2012ZX09303019) 首都衛(wèi)生發(fā)展科研專項項目(2011-4022-03) 北京市自然科學(xué)基金(7132225) 北京大學(xué)人民醫(yī)院研究與發(fā)展基金(RDB2011-17)資助~~
【分類號】:R329.2
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號:1824935
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