本文選題：甘露聚糖結合凝集素 + 野生型��； 參考：《第一軍醫(yī)大學》2005年碩士論文

【摘要】：甘露聚糖結合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)系哺乳動物C型凝集素超家族中膠凝素家族的成員,是主要由肝細胞分泌的血漿糖蛋白。作為天然免疫系統(tǒng)的重要成份,MBL是補體凝集素激活途徑的啟動因子。近年來,越來越多的研究表明,各種病原體的反復感染與MBL缺損密切相關。人MBL基因位于染色體10q11.2-q21。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)3個可導致血清(漿)MBL水平低下并進而引起調理吞噬缺損的MBL結構基因點突變:CGT52TGT、GGC54GAC和GGA57GAA,其編碼產(chǎn)物的改變分別是Arg(精氨酸)→Cys(半胱氨酸)、Gly(甘氨酸)→Asp(天冬氨酸)及Gly(甘氨酸)→Glu(谷氨酸)。這些點突變?yōu)槌Ｈ旧w共顯性遺傳,其基因頻率在不同種族人群中差異甚大,但總體來說極高,如第52位密碼突變在所研究過的人群中相對較低(≤0.1),第54位密碼突變在歐亞人群中有較高頻率(0.11～0.14),而第57位密碼突變在撒哈拉非洲人群中的頻率很高(0.23～0.29)。顯然,MBL缺損是迄今所發(fā)現(xiàn)的最常見的免疫缺損病。因此,闡明MBL基因突變引起免疫缺損的機理具有極其重要的意義。 然而,目前尚不清楚MBL基因突變導致血清(漿)MBL水平低下的直接原因,究竟是分泌減少還是結構不穩(wěn)定?為了深入研究MBL基因突變引起免疫缺損的分子機制,并進一步闡明MBL的結構與功能的關系,我們選擇CGT52TGT、GGC54GAC和GGA57GAA MBL突變體基因作為研究對象,將其在哺乳動物細胞中表達,并對瞬時表達和穩(wěn)定表達的蛋白產(chǎn)物進行了初步分析。 一、抗人MBL抗原肽多克隆抗體的制備與鑒定 在對天然MBL分子優(yōu)勢表位預測的基礎上,合成B細胞識別表位15 mer短肽NH2-EPGQGLRGLQGPPGK-COOH,將其與載體蛋白KLH偶聯(lián)后免疫新西蘭大白兔。經(jīng)ELISA法檢測抗體滴度為1:128 000。采用抗原肽親和層析純化法獲得抗人MBL抗原肽多克隆抗體MSA(MBL specific-epitope antibody),其
[Abstract]:In recent years , more and more studies have shown that repeated infection of various pathogens is closely related to the activation pathway of lectin lectin .









however , it is not clear that that direct cause of low level of serum ( plasma ) mbl caused by the mutation of mbl gene is whether the secretion is decrease or the structure is unstable ? in order to study the molecular mechanism of the immune deficiency caused by the gene mutation of the mbl , and further clarify the relationship between the structure and function of mbl , we select the CGT52TGT , GGC54GAC and GGA57GAA mbl mutant gene as the research object to express them in mammalian cells , and analyze the transient expression and the stable expression of the protein product .









Preparation and identification of anti - human IgG polyclonal antibody









On the basis of the prediction of the dominant epitope of the natural mannan , B - cell recognition epitope 15 mer short peptide NH2 - EPGQGLRGLQGPPGK - COOH was synthesized , which was conjugated with the carrier protein to immune New Zealand white rabbits . The antibody titer was 1 : 128,000 by ELISA .

【學位授予單位】：第一軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R392

【參考文獻】

相關期刊論文 前7條

1 白志軍,張麗蕓,林佐賢,盧曉,陳政良;PcDNA4/His C-MBL表達載體的構建及其在CHO細胞中的表達[J];第一軍醫(yī)大學學報;2004年08期

2 張麗蕓,陳政良,王宏偉;CGT52TGT和GGA57GAA甘露聚糖結合凝集素突變體的構建[J];免疫學雜志;2003年05期

3 陳政良,韓強濤,易正山,張麗蕓,盧曉,彭良平;人血漿MBL的分離純化及其特性鑒定[J];免疫學雜志;1998年01期

4 陳政良,朱錫華,謝佩蓉;中國人MBLc DNA的克隆與序列分析[J];免疫學雜志;1999年02期

5 陳政良;甘露聚糖結合蛋白基因突變引起的免疫缺陷[J];生命的化學(中國生物化學會通訊);1997年04期

6 陳政良;C型凝集素的免疫功能[J];細胞與分子免疫學雜志;1997年S2期

7 陳政良,盧曉,張麗蕓,韓強濤;GGC54GAC MBL突變體的構建[J];中國免疫學雜志;2001年05期

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本文編號：1823887