本文選題：假單胞菌TS1138 + 基因克隆　； 參考：《沈陽藥科大學(xué)》2005年碩士論文

【摘要】：本研究室從土壤中篩選獲得了一株假單胞菌TS1138，可轉(zhuǎn)化DL-ATC合成L-半胱氨酸。本論文對代謝途徑中的兩種轉(zhuǎn)化酶基因和一種分解酶基因在基因克隆和表達(dá)等方面進(jìn)行了研究，研究結(jié)果如下： 以pBluescript SKⅡ為載體，以大腸桿菌w3110 cysB~-為受體菌，鳥槍法成功構(gòu)建TS1138菌株的基因組隨機文庫，建立特異性篩選模型從中獲得兩段基因，并將其轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)。通過對重組蛋白的功能鑒定可知，，這兩段基因分別為L-ATC水解酶基因和S-氨甲酰-L-半胱氨酸酰胺水解酶基因。實驗從分子水平上驗證了假單胞菌由DL-ATC酶法合成L-半胱氨酸S-代途徑的正確性。 以NCBI上收錄的脫巰基酶基因為參考，自行設(shè)計引物，以TS1138菌株基因組DNA為模板，擴增得到一段基因，并表達(dá)于大腸桿菌BL21(DE3)內(nèi)。通過活性檢測對重組蛋白進(jìn)行功能鑒定可知該基因為L-半胱氨酸脫巰基酶基因。
[Abstract]:A strain of Pseudomonas sp. TS1138 was obtained from soil in our laboratory, which can transform DL-ATC to synthesize L-cysteine. In this paper, two invertase genes and one catabolic enzyme gene in metabolic pathway were studied in gene cloning and expression. The results are as follows: Using pBluescript SK 鈪

本文編號：1818532