三維培養(yǎng)對臍帶間充質(zhì)干細胞表型及造血因子基因表達的影響
本文選題:臍帶 + 間充質(zhì)干細胞; 參考:《中國實驗血液學雜志》2014年05期
【摘要】:本研究探討三維立體培養(yǎng)條件下臍帶間充質(zhì)干細胞(UC-MSC)的細胞表型變化及部分造血相關(guān)因子的基因表達,為下一步研究三維立體條件下的造血擴增及誘導分化提供基礎(chǔ)。從臍帶中分離出MSC,分別在二維及三維條件下培養(yǎng),通過流式細胞術(shù)檢測MSC表面抗原的表達水平,通過成血管試驗比較了兩種細胞的成血管能力,并通過實時定量PCR檢測兩種培養(yǎng)條件下造血相關(guān)細胞因子的基因表達情況。結(jié)果表明:從臍帶中成功地分離出了MSC,在三維培養(yǎng)條件下其內(nèi)皮細胞、內(nèi)皮祖細胞和間充質(zhì)原始干細胞的表面標記CD31、CD133和CD271等陽性細胞百分比顯著增加,體外成血管能力增強;骨架蛋白β-actin基因在三維培養(yǎng)條件下表達上調(diào),G-CSF、LIF、SCF、IL-1α、IL-1β、IL-3、IL-7和IL-11等與造血調(diào)控有關(guān)的細胞因子基因表達也有不同程度的增高,其中LIF、IL-3和IL-7升高尤為明顯;免疫調(diào)控相關(guān)的細胞因子IL-10的表達也增高,而SDF-1和IL-6的表達雖有輕微的降低,但無顯著性差異。結(jié)論:三維培養(yǎng)條件下UC-MSC的CD31、CD133和CD271表達上調(diào),體外成血管能力增強,并且多個造血相關(guān)因子的基因表達水平上調(diào)。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the phenotypic changes of UC-MSCs and the gene expression of some hematopoietic related factors in three-dimensional culture, which provided the basis for the further study of hematopoietic amplification and differentiation in three-dimensional culture. MSCs were isolated from umbilical cord and cultured in two and three dimensional conditions. The expression of MSC surface antigen was detected by flow cytometry. The vascularization ability of the two kinds of cells was compared by vascularization test. The gene expression of hematopoietic related cytokines was detected by real-time quantitative PCR. The results showed that the percentage of positive cells such as endothelial cells, endothelial progenitor cells and mesenchymal stem cells, such as CD31, CD133 and CD271, were significantly increased and the ability of vascular formation was enhanced in vitro. The expression of cytoskeleton 尾 -actin gene up-regulated the expression of IL-7 and IL-7 genes related to hematopoietic regulation, such as IL-7 and IL-11, which were related to hematopoietic regulation in different degree, especially in LIF-IL-3 and IL-7. The expression of IL-10, a cytokine related to immunomodulation, was also increased, while the expression of SDF-1 and IL-6 decreased slightly, but there was no significant difference. Conclusion: the expression of CD31, CD133 and CD271 in UC-MSC was up-regulated, and the ability of angiogenesis was enhanced in vitro, and the gene expression level of several hematopoietic related factors was up-regulated.
【作者單位】: 山東大學附屬濟南市中心醫(yī)院醫(yī)學實驗診斷中心;山東大學齊魯醫(yī)院低溫醫(yī)學研究室;
【基金】:973基金項目(2012CB966504) 山東大學自主創(chuàng)新基金(2012ZD023)資助
【分類號】:R329.28
【參考文獻】
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【共引文獻】
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,本文編號:1817130
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