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葡萄球菌屬的鑒定及分類方法研究

發(fā)布時間:2018-04-27 01:25

  本文選題:葡萄球菌 + 金黃色葡萄球菌。 參考:《貴州大學》2006年碩士論文


【摘要】:隨著食物中毒事件的頻繁發(fā)生,食品安全問題顯得越來越重要。HACCP就是為了控制食品安全衛(wèi)生而發(fā)展起來的一種國際食品安全控制體系,它是英文Hazard Analysis and Critical Control Point的縮寫,即“危害分析與關鍵控制點”系統(tǒng)。HACCP是人們用來控制食品安全危害的一種通常技術,一個分析工具,也是一種重要的管理體系,它可以與任何操作相結合,能使正在進行的食品安全性項目保持經濟有效。 葡萄球菌屬在自然界中分布廣泛,空氣、水、灰塵及人和動物的排泄物中都可以找到。本屬中金黃色葡萄球菌(金葡菌)是一種重要的食源性致病菌,為革蘭氏陽性球狀菌,直徑0.8-1.0μm,呈葡萄狀排列,有些菌株還具有莢膜或粘層。金葡菌是引起食品污染和細菌性食物中毒的一種主要細菌,食品受其污染后,不僅腐敗變質,而且部分菌株產生腸毒素,腸毒素是引起食物中毒的主要原因。目前研究發(fā)現葡萄球菌屬的其他部分種也成為人們關注的致病菌。 我國已加入WTO,,這對我國的食品加工行業(yè)來說,既是機遇也是挑戰(zhàn)。為了使我們的食品更順利地走向國際市場,有必要對金葡菌及葡萄球菌屬的其它種可能導致的危害進行準確地分析。 本文主要運用經典方法及分子生物學方法對葡萄球菌進行研究,旨在為葡萄球菌的分類及葡萄球菌檢測試劑盒的研制方法提供依據。 本文從3個部分對葡萄球菌屬進行研究: 1.葡萄球菌屬的經典方法鑒定及腸毒素測定 該部分主要是收集供試菌株,然后對其進行經典方法進行鑒定和腸毒素的測定。試驗主要運用革蘭氏染色及API Staph系統(tǒng)進行菌種的鑒定;酶聯免疫法進行腸毒素的測定。結果表明:供試的15株菌都為葡萄球菌;在分析中API Staph系統(tǒng)存在的弊端是當顏色反應不完全時,對結果判斷的影響較大;葡萄球菌屬中不僅重要致病菌金葡菌產生腸毒素,其他一些葡萄球菌也產生腸毒素,其中1,2,3,6,7,13號菌株為產毒素菌株,其余菌株為不產毒素菌株;因此,以往研究較少的非致病菌也應該成為食品檢測關注的對象。 2.葡萄球菌屬菌株rDNA的ITS序列分析 本文對15株葡萄球菌的ITS序列進行擴增,得到10株菌的序列,并對10株菌及其GenBank中的相似序列進行比對及系統(tǒng)樹的構建。結果顯示:ITS序列能為葡萄球菌屬的分類及檢測試劑盒的研制提供較好的指導作用。
[Abstract]:With the frequent occurrence of food poisoning, food safety becomes more and more important. HACCP is an international food safety control system developed to control food safety and hygiene. It is the Hazard Analysis and Critical The acronym of Control Point, or "Hazard Analysis and critical Control Point" system, is a common technology, an analytical tool, and an important management system that people use to control food safety hazards, and it can be combined with any operation. To keep ongoing food safety programs economical and effective. Staphylococcus is widely distributed in nature and can be found in air, water, dust, and human and animal excreta. Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) is an important foodborne pathogenic bacteria. It is a Gram-positive globular bacteria with diameter of 0.8-1.0 渭 m and grape-like arrangement. Some strains also have capsule or mucilage. Staphylococcus aureus is one of the main bacteria that cause food contamination and bacterial food poisoning. Food contaminated by Staphylococcus aureus not only spoils and spoils, but also produces enterotoxin, which is the main cause of food poisoning. Other species of the genus Staphylococcus have also been found to be the cause of concern. China has joined WTO, which is both an opportunity and a challenge for China's food processing industry. In order to make our food more smoothly to the international market, it is necessary to accurately analyze the possible harm caused by Staphylococcus aureus and other species of Staphylococcus. In this paper, the classical method and molecular biological method were used to study Staphylococcus in order to provide the basis for the classification of Staphylococcus and the development of staphylococcal detection kit. In this paper, the genus Staphylococcus was studied in three parts: 1. Identification of Staphylococcus and determination of Enterotoxin this part is mainly to collect the strains tested and then to identify the classical method and the determination of enterotoxin. Gram staining and API Staph system were used to identify the bacteria, and enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect enterotoxin. The results showed that all the 15 strains were staphylococci, the disadvantage of API Staph system in analysis was that when the color reaction was not complete, it had a great influence on the result judgment, Staphylococcus not only produced enterotoxin, but also produced enterotoxin in Staphylococcus, which was an important pathogen in the genus Staphylococcus. Some other staphylococci also produce enterotoxin, among them, strain No. 13 is a toxin producing strain, while the others are non-toxin producing strains. Therefore, the non-pathogenic bacteria which have been studied in the past should also be the focus of food detection. 2. ITS sequence Analysis of Staphylococcus strain rDNA in this paper, the ITS sequences of 15 strains of Staphylococcus were amplified, and the sequences of 10 strains of Staphylococcus were obtained. The similar sequences of 10 strains and their GenBank were compared and the phylogenetic tree was constructed. The results showed that its sequence could provide good guidance for the classification of Staphylococcus genus and the development of detection kit.
【學位授予單位】:貴州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R378.1;Q939

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本文編號:1808571

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