外源性TGF-β1誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞分化的實驗研究
本文選題:頜骨 + 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 ; 參考:《口腔醫(yī)學(xué)》2014年01期
【摘要】:目的探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMSCs(bone marrow mesenchymal stem cells)的分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增方法及外源性轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1(transforming growth factor-1)誘導(dǎo)BMSCs向肌成纖維細(xì)胞定向分化的可能性,為放射性誘導(dǎo)的頜骨纖維化提供體外理論依據(jù)。方法取大鼠股骨的骨髓,全髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;培養(yǎng)至第3代時分別用+/-TGF-β1的2組誘導(dǎo)培養(yǎng)基定向分化誘導(dǎo);誘導(dǎo)2周后顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,Real-time PCR檢測細(xì)胞的基因表達(dá)情況;細(xì)胞爬片行免疫組化鑒定α-SMA及膠原纖維的表達(dá)。結(jié)果大鼠股骨骨髓組織中可分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,體外生長形態(tài)類似成纖維細(xì)胞,呈梭型、紡錘型,定向誘導(dǎo)后TGF-β1組細(xì)胞可表現(xiàn)出肌成纖維細(xì)胞的特性(α-SMA+),同時伴有COLⅠ、COLⅢ、α-SMA基因的高表達(dá)。結(jié)論從大鼠股骨骨髓組織中可分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,TGF-β1能定向誘導(dǎo)BMSCs向肌成纖維細(xì)胞方向分化,為放射誘導(dǎo)的頜骨纖維萎縮機(jī)制提供了體外理論依據(jù)。
[Abstract]:Objective to investigate the isolation, culture and amplification of BMSCs (bone marrow mesenchymal stem cells) in rat bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs), and the possibility of inducing the directional differentiation of BMSCs myofibroblast induced by exogenous transforming growth factor TGF- beta 1 (transforming growth factor-1), and to provide a theoretical basis for radioactive induced maxillofacial fibrosis. Methods the bone marrow of the rat femur was taken and the bone marrow mesenchymal stem cells were isolated and cultured in the full marrow culture method. When cultured to third generations, 2 groups of +/-TGF- beta 1 were induced to induce differentiation, and the morphological changes of the cells were observed under the microscope after 2 weeks. The gene expression of the cells was detected by Real-time PCR, and the cell crawling film was used to identify the alpha -SMA by immunohistochemistry. Results the bone marrow mesenchymal stem cells can be separated from the bone marrow tissue of the rat femur. The growth morphology is similar to the fibroblast, spindle type and spindle type. After directed induction, TGF- beta 1 groups can show the characteristics of myofibroblast (alpha -SMA+), accompanied by the high expression of COL I, COL III, and alpha -SMA gene. Bone marrow mesenchymal stem cells can be separated from the bone marrow tissue of the rat femur. TGF- beta 1 can induce BMSCs to differentiate into myofibroblast direction, which provides a theoretical basis for the mechanism of radiation-induced atrophy of the jaws.
【作者單位】: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)院口腔頜面頭頸腫瘤科 上海市口腔醫(yī)學(xué)重點實驗室;上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)院口腔放療科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81271112) 上海市教委“曙光計劃”(10SG19)
【分類號】:R329.26
【共引文獻(xiàn)】
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