膽固醇流出對ox-LDL誘導的巨噬細胞凋亡的影響
本文選題:膽固醇流出 + 氧化型低密度脂蛋白 ; 參考:《南華大學》2005年碩士論文
【摘要】:目的:研究膽固醇流出對ox-LDL誘導的巨噬細胞凋亡的影響。 方法:用50mg/Lox-LDL與RAW264.7細胞共同孵育0,12,24,48,96小時。用50mg/Lox-LDL處理RAW264.7細胞48小時后加入不同濃度的HDL_3(50,100,200mg/L)和膽固醇流出抑制劑Brefeldin(BFA)或膽固醇流出促進劑β-cyclodextrin(β-CD)孵育24小時。油紅O染色觀察細胞內(nèi)脂滴的形成情況;高效液相分析法檢測細胞內(nèi)膽固醇含量;液體閃爍計數(shù)器檢測細胞內(nèi)膽固醇流出;Hoechst33258觀察細胞凋亡形態(tài);流式細胞儀檢測細胞凋亡。 結(jié)果:用50mg/Lox-LDL與RAW264.7細胞共同孵育0,12,24,48,96小時,結(jié)果顯示:RAW264.7細胞的凋亡率隨著處理時間的延長而顯著提高。在50mg/Lox-LDL與RAW264.7細胞共同孵育48小時出現(xiàn)明顯的凋亡形態(tài)學改變(胞質(zhì)體積縮小,胞核凝集、邊緣化),油紅O染色顯示,細胞內(nèi)的大量脂滴形成,細胞膽固醇酯含量顯著增加,細胞呈典型泡沫化形態(tài)。用50mg/Lox-LDL處理RAW264.7細胞48小時后,加入不同濃度的HDL_3(50,100,200mg/L)和膽固醇流出抑制劑BFA(4μmol)或β-CD(10mmol/L)孵育24小時。結(jié)果顯示:HDL_3呈濃度依賴性的促進細胞內(nèi)膽固醇流出和降低細胞內(nèi)的膽固醇含量,油紅O染色顯示,細胞內(nèi)的脂滴明顯減少。細胞的凋亡率也隨著HDL_3濃度的升高而逐漸降
[Abstract]:Aim: to study the effect of cholesterol efflux on apoptosis of macrophages induced by ox-LDL. Methods: 50mg/Lox-LDL and RAW264.7 cells were incubated for 96 hours. RAW264.7 cells were treated with 50mg/Lox-LDL for 48 hours and incubated with different concentrations of HDL350100mg / L and cholesterol efflux inhibitor Brefeldin-BFA or cholesterol efflux enhancer 尾 -cyclodextrin (尾 -CD1) for 24 hours. Oil red O staining was used to observe the formation of lipid droplets in cells; high performance liquid chromatography (HPLC) was used to detect the content of cholesterol in cells; liquid scintillation counter was used to detect cholesterol efflux in cells; Hoechst33258 was used to observe the morphology of apoptosis; flow cytometry was used to detect apoptosis. Results: #number0# RAW264.7 cells were incubated with 50mg/Lox-LDL for 48 hours for 96 hours. The results showed that the apoptosis rate of 10% RAW264.7 cells increased significantly with the prolongation of treatment time. After 50mg/Lox-LDL was incubated with RAW264.7 cells for 48 hours, there were obvious morphological changes of apoptosis (reduced cytoplasmic volume, nuclear agglutination, marginalization, oil red O staining showed that a large number of lipid droplets were formed in the cells, and the content of cholesterol ester in the cells increased significantly. The cells showed typical foaming morphology. RAW264.7 cells were treated with 50mg/Lox-LDL for 48 hours and incubated with HCL 350100200mg / L and cholesterol efflux inhibitor BFA(4 渭 mol / L or 尾 -CDN 10mmol / L for 24 hours. The results showed that WHDL3 promoted cholesterol efflux and decreased cholesterol content in cells in a concentration-dependent manner. Oil red O staining showed that lipid droplets in the cells decreased significantly. The apoptosis rate decreased with the increase of HDL_3 concentration.
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R363
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,本文編號:1779512
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