本文選題：鉤端螺旋體 + 問號/致病力�。� 參考：《浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2005年01期

【摘要】：目的 :了解問號鉤端螺旋體 (簡稱鉤體 )主要外膜蛋白 Omp L 1、Lip L 32和 L ip L 4 1免疫功能表位及其致炎作用。方法 :建立 Ni- NTA親和層析法 ,提取不同基因型表達(dá)的目的重組蛋白 r Omp L1/ 1和 Omp L1/ 2、L ip L32 / 1和 r Lip L32 / 2、Lip L4 1/ 1和 r Lip L4 1/ 2。采用 SDS- PAGE檢測上述目的重組蛋白的表達(dá)情況和提取物純度。分別采用 Signal P3.0預(yù)測服務(wù)器 Signal P- NN軟件、Propred MHC class- binding peptide prediction- Pro Pred預(yù)測服務(wù)器 EMBOSS軟件 ,對上述蛋白的信號肽、MHC- 類分子結(jié)合肽和 B細(xì)胞表位進(jìn)行分析。以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株EVC- 30 4為效應(yīng)細(xì)胞 ,采用 EL ISA檢測上述目的重組蛋白誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 EVC- 30 4分泌 IL - 1、IL - 8和TNF- α的作用。結(jié)果 :在 IPTG誘導(dǎo)下 ,所構(gòu)建的原核表達(dá)系統(tǒng)可有效表達(dá) r Omp L1/ 1和 r Omp L1/ 2、r Lip L32 / 1和r Lip L32 / 2、r L ip L4 1/ 1和 r Lip L4 1/ 2 ,其產(chǎn)量分別約占細(xì)菌總蛋白的 30 %和 15 %、4 0 %和 35 %、15 %和 10 %。提純后的目的重組蛋白 SDS- PAGE后均僅見單一的蛋白條帶。Omp L1s、Lip L32 / 1和 Lip L32 / 2、Lip L4 1s的信號肽分別位于 N端 1- 2 4、1- 2 1和 1- 2 4、1- 2 4位氨基酸殘基。 Omp L 1s、Lip
[Abstract]:Aim: to investigate the immunoreactive epitopes of Leptospira interrogans (Leptospira interrogans) and their inflammatory effects.Methods: Ni- NTA affinity chromatography was established to extract the recombinant proteins r Omp L 1 / 1, Omp L 1 / 2 LP L 32 / 1 and r Lip L 32 / 2 Lip L 41 / 1 and r Lip L 41 / 1 and r Lip L 41 / 1 expressed in different genotypes.SDS- PAGE was used to detect the expression and purity of the recombinant protein.The Signal P3.0 predictive server Signal P- NN was used to analyze the signal peptide MHC-like binding peptides and B cell epitopes of the above proteins. The EMBOSS software was used to predict the class- binding peptide prediction-Pro Pred.Human umbilical vein endothelial cell line EVC-304 was used as effector cell line. The effect of recombinant human umbilical vein endothelial cell line EVC-304 on secretion of IL-1 IL-8 and TNF- 偽 was detected by El ISA.Results: the constructed prokaryotic expression system could effectively express r Omp L 1 / 1 and r Omp L 1 / 2 r Lip L 32 / 1 and r Lip L 32 / 2 r LP L 41 / 1 and r Lip L 41 / 2 under IPTG induction.Its yield was about 30% and 15% of the total bacterial protein, respectively, and 35% and 10% of the total bacterial protein, respectively.After purification of SDS- PAGE, only a single protein band. MMP L 1s Lip L 32 / 1 and Lip L 32 / 2 Lip L 41 s signal peptides were found at N-terminal 1-2 4G 1-21 and 1-24N 1- 24 amino acid residues, respectively.Omp L 1s,Lip
【作者單位】： 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室 紹興文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目 (39970 6 78)
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

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【共引文獻(xiàn)】

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2 嚴(yán)杰,釗守鳳,毛亞飛,阮萍,羅依惠,李淑萍,李立偉;問號鉤端螺旋體屬lipL32/1-ompL1/1融合基因的真核表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物的免疫反應(yīng)性[J];浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年01期

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【二級參考文獻(xiàn)】

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1 范興麗,嚴(yán)杰,毛亞飛,李立偉,李淑萍;問號鉤端螺旋體血清群LipL32基因型分析及其重組蛋白的免疫學(xué)鑒定[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2004年02期

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【相似文獻(xiàn)】

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3 駐鄂記者 錢忠軍　通訊員 范群侯 秋梅;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)首例真菌DNA病毒[N];文匯報;2010年

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5 記者 韓曉玲　通訊員 胡今天;華中農(nóng)大揭開真菌DNA病毒之謎[N];湖北日報;2010年

6 魯偉 范敬群;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)首例核盤菌DNA病毒[N];科學(xué)時報;2010年

7 山東魯抗舍里樂藥業(yè)有限公司 牛志強(qiáng) 鄭敏;養(yǎng)殖場消毒劑使用概述[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2010年

8 北京學(xué)者 張?zhí)锟?春節(jié)發(fā)生禽流感，，幾率有多大？[N];東方早報;2009年

9 記者 鄭靈巧;豬鏈球菌研究進(jìn)展改變救治原則[N];健康報;2009年

10 王鵬　賈志陽 孟偉;隔離是規(guī)模養(yǎng)殖場防治重大動物疫病的關(guān)鍵措施[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2009年

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2 向s慍

本文編號：1750695