本文選題：鉤端螺旋體　切入點：毒力相關(guān)基因　出處：《四川大學(xué)》2006年博士論文

【摘要】：鉤端螺旋體病(簡稱鉤體病)是由鉤端螺旋體引起的一種人獸共患自然免疫源性疾病，它在世界范圍內(nèi)流行，并嚴(yán)重危害人類的健康和農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)。鉤端螺旋體(簡稱鉤體)在結(jié)構(gòu)和遺傳特征上都比較特殊，因而大多數(shù)細(xì)菌學(xué)研究方法不適于鉤體研究。隨著中國南方中心對賴型鉤體56601的測序完成，為鉤體病的研究提供了新的契機(jī)，但是與鉤體致病或毒力相關(guān)的因子研究報道還相對較少，，致使鉤體致病的分子機(jī)制研究進(jìn)展緩慢。因此，闡明鉤端螺旋體的致病機(jī)制是控制本病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 本室曾以抑制消減雜交技術(shù)(Substration Suppressive Hybridization，SSH)篩選得到致病鉤體與非致病鉤體的差異基因片段，并采用盒式連接半巢式PCR技術(shù)擴(kuò)增出ompl17基因，進(jìn)行序列測定、生物信息學(xué)分析，同時采用基因打靶技術(shù)進(jìn)行了功能的初步分析和探討。本研究既往工作的基礎(chǔ)上，對賴型鉤體ompl17基因進(jìn)行擴(kuò)增表達(dá)，制備抗血清，分析該基因在賴型鉤體體內(nèi)外和不同溫度下表達(dá)情況，同時對該蛋白進(jìn)行表達(dá)純化，采用構(gòu)建血管內(nèi)皮細(xì)胞基底膜進(jìn)行血細(xì)胞的趨化分析，以及采用酵母雙雜交技術(shù)釣取ompl17基因在體內(nèi)相互作用的靶蛋白，為闡明鉤體分子致病機(jī)制作出新的探索。
[Abstract]:Leptospirosis (referred to as leptospirosis) is a zoonotic disease caused by natural immunogenicity of Leptospira, it is popular in the world, and serious harm to human health and animal husbandry. Leptospira (leptopira) on the structure and genetic characteristics are quite special, so most bacteriological study method is not suitable for Leptospira research. With China Center of Leptospira Lai South 56601 sequencing, provides a new opportunity for the study of leptospirosis, but factor related research reports and Leptospira virulence is relatively less, the research progress in molecular mechanisms of the pathogenic Leptospira slowly. Therefore, to clarify the pathogenic mechanism of Leptospira the body is the key to control the disease.
The room was by suppression subtractive hybridization (Substration Suppressive Hybridization, SSH) were screened between pathogenic and non pathogenic Leptospira gene fragment, and connected with a semi nested PCR ompL17 gene was amplified by cassette, sequenced, bioinformatics analysis, and the function of the preliminary analysis and discussion by gene targeting. Based on the previous work, the Lai Leptospira ompL17 gene amplified expression, antiserum preparation, analysis and expression of the gene in Leptospira Lai in vivo at different temperatures and at the same time, the protein was expressed and purified, analyzed by chemotactic blood cells to construct vascular endothelial cells of the basilar membrane, and the use of the yeast two hybrid technique to catch the target protein ompL17 gene in vivo interaction, make new exploration in order to elucidate the molecular pathogenesis of Leptospira.

【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R377

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1726060