本文選題：脂肪干細(xì)胞　切入點(diǎn)：細(xì)胞培養(yǎng)　出處：《海南醫(yī)學(xué)》2014年09期

【摘要】：目的分離、培養(yǎng)和凍存大鼠脂肪干細(xì)胞,并對(duì)其相關(guān)的細(xì)胞表型進(jìn)行研究,為利用脂肪干細(xì)胞治療梗阻性腎病腎纖維化等實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)。方法取大鼠3只,經(jīng)消毒麻醉,采集其腹股溝處脂肪組織分離培養(yǎng)其中的脂肪干細(xì)胞,用相差倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)方式及形態(tài)變化。取第三代細(xì)胞用流式細(xì)胞儀作細(xì)胞免疫表型的鑒定。凍存復(fù)蘇后再次檢測(cè)干細(xì)胞生長(zhǎng)情況及表型。結(jié)果大鼠脂肪組織中含有大量間充質(zhì)干細(xì)胞,原代培養(yǎng)的ASCs呈小圓形或星形,經(jīng)傳代后的脂肪干細(xì)胞形態(tài)比較均一,呈長(zhǎng)梭形,個(gè)別略呈多角形、漩渦樣生長(zhǎng)。其細(xì)胞表型為CD29、CD44高表達(dá),CD73、CD105中等程度表達(dá),CD34極低表達(dá)。脂肪干細(xì)胞經(jīng)低溫凍存3個(gè)月,復(fù)蘇后,生長(zhǎng)活力和存活率與凍存前未見(jiàn)明顯區(qū)別,CD44和CD29檢測(cè)與凍存前表達(dá)率也一致。結(jié)論建立了一種脂肪干細(xì)胞的有效分離、培養(yǎng)及保存方法,并對(duì)其表面標(biāo)志物進(jìn)行鑒定,為利用脂肪干細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究提供了依據(jù)。
[Abstract]:Objective to isolate, culture and freeze adipose stem cells from rats, and to study the phenotype of adipose stem cells in order to provide evidence for the treatment of renal fibrosis with obstructive nephropathy by adipose stem cells.Methods the adipose stem cells were isolated from adipose tissue in groin of 3 rats after disinfectant anesthesia. The growth patterns and morphological changes of the cells were observed by phase contrast inverted microscope.The third generation cells were identified by flow cytometry.After cryopreservation and resuscitation, the growth and phenotype of stem cells were examined again.Results there were a large number of mesenchymal stem cells in adipose tissue of rats. The primary cultured ASCs was small round or star-shaped. After passage, the adipose stem cells were uniform in shape and long fusiform, and some of them were polygonal and whirlpool.The phenotype of CD29 and CD44 was high and CD73 and CD105 were moderately expressed and the expression of CD34 was extremely low.After cryopreservation for 3 months, the growth activity and survival rate of adipose stem cells were not significantly different from those before cryopreservation and the expression rates of CD44 and CD29 were the same.Conclusion an effective method for the isolation, culture and preservation of adipose stem cells was established, and its surface markers were identified, which provided a basis for further experimental study on adipose stem cells.
【作者單位】： 成都市第五人民醫(yī)院病理科;成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：四川省衛(wèi)生廳資助項(xiàng)目(編號(hào):110520) 成都市科技局資助項(xiàng)目(編號(hào):313-106) 成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院基金項(xiàng)目(編號(hào):Y2009003)
【分類號(hào)】：R329.2

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