本文選題：漢灘病毒　切入點(diǎn)：S基因　出處：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2006年博士論文

【摘要】：HSP70是一個(gè)高度保守的蛋白，其在蛋白的合成、折疊、轉(zhuǎn)運(yùn)以及抗原的加工遞呈過程中均具有重要作用。研究表明，HSP70可作為一種分子載體，增強(qiáng)與其結(jié)合蛋白的抗原性。漢灘病毒是布尼亞病毒科漢坦病毒(Hantaviruses，HV)的血清型之一，為單股負(fù)鏈RNA病毒，其基因組有大(L)、中(M)、小(S)3個(gè)片段組成，分別編碼病毒相關(guān)的依賴RNA的RNA聚合酶、囊膜糖蛋白(glycoprotein，GP)G1和G2及核衣殼蛋白(nucleocapsidprotein．NP)四種結(jié)構(gòu)蛋白。其中NP具有很強(qiáng)的抗原性和免疫原性，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體出現(xiàn)時(shí)間早、滴度高、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，而且也是CTLs(CytotoxicT lymphocytes)識(shí)別的主要抗原之一。本實(shí)驗(yàn)室以往研究發(fā)現(xiàn)，HTNV感染的動(dòng)物體內(nèi)存在HSP70-NP復(fù)合物�；贜P的漢坦病毒免疫一直受到廣泛研究，而將HSP70與漢灘病毒76-118株S基因相結(jié)合用于抗HTNV免疫尚未見報(bào)道。 本研究構(gòu)建了HSP70與HTNV S融合蛋白疫苗與基因疫苗，以HSP70為疫苗載體(免疫佐劑)，HTNV NP為靶抗原，研究疫苗對(duì)機(jī)體體液及細(xì)胞免疫作用的影響。 1．HSP70-NP融合蛋白原核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)與鑒定分別構(gòu)建了pGEX-4T-1／HSP70-S，pGEX-4T-1／HSP70，pET28a／S三種原核表達(dá)載體。用IPTG對(duì)含有pGEX-4T-1／HSP70-S，pGEX-4T-1／HSP70
[Abstract]:HSP70 is a highly conserved protein, which plays an important role in protein synthesis, folding, transport and antigen processing and presentation.The results showed that HSP70 could be used as a molecular carrier to enhance the antigenicity of its binding proteins.Hantavirus is one of the serotypes of HantavirusesHVof Bunyaviridae. It is a single-stranded negative-stranded RNA virus. Its genome is composed of three segments, namely, large Laphne, midribosome and Sus, which encode RNA polymerase dependent on RNA, which is associated with the virus.Glycoprotein glycoprotein (GP) G 1 and G 2 and nucleocapsidprotein. NPs.NP has strong antigenicity and immunogenicity, and it is one of the main antigens recognized by CTLs(CytotoxicT lymphocytes.Previous studies in our laboratory have found that HSP70-NP complexes exist in animals infected with HTNV.The immunization of Hantavirus based on NP has been widely studied, but the combination of HSP70 and S gene of Hantaan virus 76-118 strain has not been reported.In this study, HSP70 and HTNV S fusion protein vaccine and gene vaccine were constructed, and HSP70 was used as vaccine vector to study the effect of the vaccine on humoral and cellular immunity.Three prokaryotic expression vectors pGEX-4T-1 / HSP70-SSP70-pGEX-4T-1 / HSP70pET28a / S were constructed by construction, expression and identification of prokaryotic expression vector of 1.HSP70-NP fusion protein.PGEX-4T-1 / HSP70-Sn pGEX-4T-1 / HSP70 using IPTG
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張夢(mèng)華,王航雁,楊為松,黃長(zhǎng)形,李光玉,汪毅,白雪帆;漢灘病毒S基因免疫小鼠的細(xì)胞免疫應(yīng)答的初步觀察[J];病毒學(xué)報(bào);2000年03期

2 姚樹元,杭長(zhǎng)壽,邱建明,馬章亮,李德新,薛穎,李川,宋干;漢灘病毒糖蛋白G1 G2和核蛋白NP在痘苗病毒天壇株中的聯(lián)合表達(dá)[J];病毒學(xué)報(bào);1998年02期

3 馬章亮,杭長(zhǎng)壽,邱建明,姚樹元,宋干;漢灘病毒 A9 株M基因片段在重組痘苗病毒中的表達(dá)及鑒定[J];病毒學(xué)報(bào);1998年03期

4 張芳琳,劉勇,白文濤,吳興安,于瀾,史夢(mèng)遠(yuǎn),胡剛,王海濤,徐志凱;漢坦病毒嵌合基因G2S0.7在昆蟲細(xì)胞中融合表達(dá)產(chǎn)物的免疫學(xué)研究[J];生物技術(shù)通訊;2003年05期

5 徐志凱,王海濤,肖毅,汪力亞,鄒海殊,王晶翼,汪美先;腎綜合征出血熱病毒50kD結(jié)構(gòu)蛋白的抗原位點(diǎn)分析[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1992年02期

6 張芳琳,徐志凱,閻巖,羅雯,劉勇,吳興安,白文濤,趙茜,王海濤;漢灘病毒M、S基因部分片段嵌合基因真核載體的構(gòu)建與基因免疫[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2001年05期

7 黃長(zhǎng)形,楊為松,杭長(zhǎng)壽,白雪帆,李光玉;在大腸桿菌中分別表達(dá)漢灘病毒素膜糖蛋白G1和G2[J];中國(guó)病毒學(xué);1997年04期

8 葉苓,楊守京,劉彥仿;漢灘病毒感染誘導(dǎo)熱休克蛋白70表達(dá)[J];中國(guó)病毒學(xué);2000年02期

9 薛小平,徐志凱,馬文煜,尹文,張芳琳,閆巖,吳興安,白文濤;漢灘病毒核蛋白的分段表達(dá)及抗原表位分析[J];中國(guó)病毒學(xué);2000年03期

10 趙君,楊守京,劉彥仿;漢坦病毒感染誘導(dǎo)乳鼠腦神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)熱休克蛋白70[J];中國(guó)病毒學(xué);2001年01期

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本文編號(hào)：1715740