OPN影響小鼠MSCs遷移及其相關(guān)分子機制研究
本文選題:骨橋蛋白質(zhì) 切入點:骨髓間充質(zhì)干細胞 出處:《重慶醫(yī)學》2014年04期
【摘要】:目的探討外源骨橋蛋白(OPN)對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)遷移能力的影響。方法采用OPN-/-小鼠和野生型C57小鼠,進行MSCs的原代分離培養(yǎng),流式細胞術(shù)鑒定分揀MSCs細胞傳代培養(yǎng);Transwell遷移實驗檢測OPN是否能夠誘導MSCs定向遷移;蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測OPN、CD44和Integrinβ1相關(guān)蛋白的表達變化。結(jié)果傳代后的細胞形態(tài)符合MSCs特征,細胞表達CD44和CD105,但不表達CD34,符合MSCs表面標記抗原的一般規(guī)律。0.5μg/mL的OPN能增加體外MSCs的細胞遷移,而野生型C57小鼠MSCs細胞遷移為最多。同時,這一趨勢與OPN作用時間正相關(guān),與OPN-/-小鼠相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。0.5μg/mL重組OPN蛋白量明顯增加,但仍低于野生型C57小鼠,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。若以O(shè)PN-/-小鼠為基數(shù)100,0.5μg/mL重組OPN組CD44、Integrinβ1蛋白表達增多,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);而野生型C57小鼠細胞CD44、Integrinβ1蛋白表達最多,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結(jié)論 OPN可以通過上調(diào)CD44、Integrinβ1的表達,促進MSCs定向遷移。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of osteopontin (OPN) on the migration of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) in mice. Flow cytometry (FCM) was used to detect whether OPN could induce the directional migration of MSCs cells and the expression of CD44 and Integrin 尾 1 related proteins were detected by Western blot.The results showed that the morphology of cultured MSCs cells was in accordance with the characteristics of MSCs, and the expression of CD44 and Integrin 尾 1 related proteins were detected by Western blotting. The cells expressed CD44 and CD105, but did not express CD34. OPN with 0.5 渭 g/mL in accordance with the general rule of MSCs surface marker antigen could increase the cell migration of MSCs in vitro, while the MSCs cells of wild-type C57 mice had the most migration. Meanwhile, this trend was positively correlated with the time of OPN treatment. Compared with OPN-r-mice, the amount of recombinant OPN protein of P0.05U. 0.5 渭 g/mL was significantly increased, but still lower than that of wild-type C57 mice, and the difference was statistically significant (P 0.01). If the expression of CD44 integrin 尾 1 protein was increased in the recombinant OPN group based on 100n- / -mouse, the expression of CD44 integrin 尾 1 protein was increased. The difference was statistically significant (P 0.01), while the expression of CD44N integrin 尾 1 protein was the highest in wild-type C57 mice. Conclusion OPN can promote the directional migration of MSCs by up-regulating the expression of CD44G integrin 尾 1.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學附屬西南醫(yī)院整形外科;
【基金】:國家自然科學基金面上項目(81071563)
【分類號】:R329
【共引文獻】
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本文編號:1682061
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