本文選題：弓形蟲　切入點：可溶性速殖子抗原　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2006年碩士論文

【摘要】： 實驗?zāi)康?觀察可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen, STAg)和IFN-γ佐劑滴鼻免疫小鼠誘導(dǎo)的黏膜和系統(tǒng)免疫應(yīng)答及持續(xù)時間,研究其抗弓形蟲感染的能力,探討STAg和IFN-γ滴鼻免疫誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答機制,為鼻內(nèi)弓形蟲復(fù)合疫苗的研制提供實驗依據(jù)。 實驗方法 本研究分三部分:第一部分觀察鼻內(nèi)給予IFN-γ對小鼠的抗弓形蟲感染的保護作用。將6～7周齡BALB/c小鼠45只隨機分為3個組,每組15只,分別經(jīng)口感染弓形蟲速殖子前或后鼻內(nèi)給予IFN-γ或感染前鼻內(nèi)給予注射用水(對照組),觀察小鼠健康狀況及死亡情況,在感染后第30天處死小鼠,計數(shù)肝、脾、腦組織內(nèi)弓形蟲速殖子。 第二部分觀察IFN-γ作為佐劑的弓形蟲STAg疫苗免疫效果。將5～6周齡雌性BALB/c小鼠45只隨機分為3個組,分別用20μg STAg、20μg STAg+1000U IFN-γ鼻內(nèi)免疫小鼠2次,對照組用等量PBS滴鼻,間隔14天。末次免疫后第10天,用RH株弓形蟲速殖子4×104個/只灌胃攻擊,逐日記錄小鼠體重,觀察小鼠存活情況。攻擊后第43天處死全部小鼠,分離計數(shù)腦、肝組織速殖子;計數(shù)IEL、PP結(jié)和脾T淋巴細(xì)胞;ELISA法檢測小鼠鼻咽沖洗液、肺沖洗液、陰道沖洗液、糞便中弓形蟲特異性IgA和血清IgG抗體。 第三部分觀察STAg抗原聯(lián)合IFN-γ佐劑滴鼻免疫小鼠誘導(dǎo)黏膜及系統(tǒng)免疫應(yīng)答持續(xù)時間。將BALB/c小鼠84只隨機分為實驗組和對照組,實驗組以STAg(20ug/只)為抗原、IFN-γ(1000U/只)為佐劑滴鼻免疫,對照組以PBS滴鼻。滴鼻2次,間隔2周,分別于未免疫時、首次免疫后第2周、加強免疫后第2、4、6、8、10周處死小鼠。ELISA法測定血清及鼻咽、肺、腸沖洗液IgA、IgG變化;稱取胸腺、脾臟重量;分離脾、腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(intestinal intraepithelial lymphocytes, IEL)并計數(shù)。 結(jié)果 第一部分小鼠感染前和感染后鼻內(nèi)給予IFN-γ,存活率(P0.05)和體重(P0.01)高于對照組,肝、脾、腦中速殖子的數(shù)量顯著低于對照組(P0.01)。 第二部分STAg+IFN-γ組小鼠存活率顯著高于STAg組和對照組(P0.05);腦、肝組織內(nèi)速殖子蟲荷比STAg組和對照組顯著減少(P0.01);IEL、PP結(jié)和脾T淋巴細(xì)胞都發(fā)生了顯著增殖性應(yīng)答,與STAg和對照組相比增生明顯(P0.05);鼻咽沖洗液、肺沖洗液、陰道沖洗液弓形蟲特異性IgA顯著增高,顯著高于對照組(P0.05);血清IgG抗體顯著高于STAg和對照組(P0.01)。 第三部分實驗中小鼠胸腺重量減輕,但組間無差異。小鼠脾臟在首次免疫后第2周和
[Abstract]:Experimental purpose. To observe the mucosal and systemic immune response and duration induced by soluble tachyzoite antigen( STAg) and IFN- 緯 adjuvant in mice, to study its ability to resist Toxoplasma gondii infection, and to explore the mechanism of immune response induced by STAg and IFN- 緯 nasal immunization. To provide experimental basis for the development of Toxoplasma gondii compound vaccine. Experimental method. This study was divided into three parts: the first part was to observe the protective effect of intranasal administration of IFN- 緯 on Toxoplasma gondii infection in mice. 45 BALB/c mice aged 6 to 7 weeks were randomly divided into 3 groups with 15 mice in each group. Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii. Toxoplasma gondii Tachyzoites in brain. In the second part, the immune effect of Toxoplasma gondii STAg vaccine with IFN- 緯 as adjuvant was observed. Forty-five female BALB/c mice aged 5 to 6 weeks were randomly divided into 3 groups, which were immunized intranasal with 20 渭 g STAgor 20 渭 g STAg 1000U IFN- 緯 twice, while those in control group were given the same amount of PBS. On the 10th day after the last immunization, Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Tachyzoites of RH strain 4 脳 104 per day were administered intragastrically to record the body weight and observe the survival of the mice. On the 43rd day after the attack, all the mice were killed and the brain and liver tissue tachyzoites were isolated and counted. The specific IgA of Toxoplasma gondii and serum IgG antibody in mice nasopharynx lavage fluid, lung lavage fluid, vaginal lavage fluid and feces were detected by Elisa. The third part was to observe the duration of induction of mucosal and systemic immune response in mice immunized with STAg antigen and IFN- 緯 adjuvant. 84 BALB/c mice were randomly divided into experimental group and control group. STAg(20ug/ was used as antigen in experimental group. In the control group, the mice were killed at the 2nd week after the first immunization at the second week after the first immunization, and the mice were killed by Elisa at the 10th week after the first immunization, and the serum, nasopharynx, lung and intestinal irrigation fluid were measured by Elisa, and the weight of thymus and spleen was taken. The intestinal intraepithelial lymphocytes (IELs) were isolated and counted. Results. The number of tachyzoites in liver, spleen and brain of mice before and after infection was significantly lower than that in control group (P 0.05) and body weight (P 0.01), and the number of tachyzoites in liver, spleen and brain was significantly lower than that in control group. In the second part, the survival rate of mice in STAg IFN- 緯 group was significantly higher than that in STAg group and control group (P 0.05). The specific IgA of Toxoplasma gondii in nasopharyngeal lavage fluid, pulmonary lavage fluid and vaginal lavage fluid was significantly higher than that in control group (P 0.05), and serum IgG antibody was significantly higher than that in STAg and control group (P 0.01). In the third part of the experiment, the weight of thymus was reduced, but there was no difference between the groups.
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R392

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本文編號：1665158