本文選題：lambdal干擾素　切入點：epsilon干擾素　出處：《蘇州大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的：研究新型干擾素hIFN-λ1和hIFN-ε基因在WI-38細(xì)胞中的表達(dá)及其生物學(xué)活性，并進(jìn)行對比分析。 方法：利用PCR法由原重組表達(dá)載體重新構(gòu)建His重組融合表達(dá)載體pcDNA3.1A-hIFN-λ1-His和pcDNA3.1A-hIFN-ε-His，脂質(zhì)體法分別轉(zhuǎn)染W(wǎng)I-38人胚肺細(xì)胞，G418篩選獲得轉(zhuǎn)基因細(xì)胞并經(jīng)PCR、RT-PCR和dot-ELISA鑒定。采用微量細(xì)胞病變抑制試驗研究和比較rhIFN-λ1-His和rhIFN-ε-His對HSV-Ⅰ、PolioV和Ad3病毒的抗病毒活性；MTT法檢測其對SHG-44、MDA-MB-231和SMMC-7721腫瘤細(xì)胞生長的影響；RT-PCR相對定量法檢測其誘導(dǎo)WI-38和SHG-44細(xì)胞產(chǎn)生人MxA抗病毒蛋白的活性。 結(jié)果：結(jié)果表明WI-38細(xì)胞中能夠穩(wěn)定表達(dá)rhIFN-λ1-His和rhIFN-ε-His蛋白，兩者均具有抗HSV-Ⅰ、PolioV、Ad3病毒活性和抑制SHG-44、MDA-MB-231和SMMC-7721腫瘤細(xì)胞的生長，，并均能誘導(dǎo)WI-38和SHG-44細(xì)胞產(chǎn)生MxA蛋白；但rhIFN-λ1-His抗病毒活性、抗腫瘤細(xì)胞增殖活性和誘導(dǎo)產(chǎn)生MxA蛋白活性要強于rhIFN-ε-His。 結(jié)論：hIFN-λ1和hIFN-ε干擾素的抗病毒效應(yīng)的分子機理均與誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生MxA抗病毒蛋白相關(guān)。本研究為進(jìn)一步探討和比較hIFN-λ1和hIFN-ε的生物學(xué)活性及其作用機制奠定了一定的基礎(chǔ)。
[Abstract]:Aim: to study the expression and biological activity of hIFN- 位 1 and hIFN- 蔚 genes in WI-38 cells. Methods: His fusion expression vectors pcDNA3.1A-hIFN- 位 1-His and pcDNA3.1A-hIFN- 蔚 -Hiswere constructed by PCR method from the original recombinant expression vector. The transgenic cells were screened by liposome transfection into WI-38 human embryonic lung cells and identified by RT-PCR and dot-ELISA. The antiviral activity of rhIFN- 位 1-His and rhIFN- 蔚 -His on HSV- 鈪

本文編號：1615502