本文選題：鼠多瘤病毒　切入點(diǎn)：病毒樣顆粒　出處：《天津大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與工程技術(shù)版)》2014年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：鼠多瘤病毒樣顆粒(VLPs)可由結(jié)構(gòu)蛋白VP1自組裝而成,可用于疫苗開發(fā)、基因治療、藥物傳遞和生物材料等方面.針對目前VP1生產(chǎn)中需要凝血酶去除谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)標(biāo)簽,生產(chǎn)成本較高、操作復(fù)雜的問題,利用內(nèi)含肽(intein)自剪切的特征,將內(nèi)含肽插入到VP1與GST標(biāo)簽之間進(jìn)行融合表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)親和色譜純化,并通過改變柱內(nèi)pH值、溫度誘導(dǎo)內(nèi)含肽剪切,使VP1與GST-intein分離從而獲得VP1蛋白,產(chǎn)量為4,mg/(L培養(yǎng)基).純化的VP1可自組裝成與天然鼠多瘤病毒樣顆粒一致的VLPs.結(jié)果表明,內(nèi)含肽介導(dǎo)鼠多瘤病毒樣顆粒生產(chǎn)純化流程簡單易行,且無需凝血酶參與,大幅降低成本,為VLPs的高效制備奠定了基礎(chǔ).
[Abstract]:Murine polytumor-like virus (MPV) particles can be self-assembled from structural protein VP1 and can be used in vaccine development, gene therapy, drug delivery and biomaterials, etc. In view of the need for thrombin to remove glutathione S-transferase (GST) label in VP1 production at present, In order to solve the problem of high production cost and complex operation, the peptide was inserted into the VP1 and GST label for fusion expression. The product was purified by affinity chromatography, and the pH value in the column was changed by changing the pH value in the column. VP1 protein was isolated from GST-intein by temperature-induced peptide shearing. The yield of VP1 protein was 4 mg / L. The purified VP1 could self-assemble into VLPslike particles of natural murine polytumour virus. The purification process of murine polytumour virus-like particles mediated by peptide was simple and without thrombin participation, which greatly reduced the cost, which laid a foundation for the efficient preparation of VLPs.
【作者單位】： 天津大學(xué)化工學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(21236005,21006069) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)資助項(xiàng)目(2012AA020206) 天津市應(yīng)用基礎(chǔ)及前沿技術(shù)研究計(jì)劃重點(diǎn)資助項(xiàng)目(13JCZDJC31100) 天津市國際科技合作項(xiàng)目(11ZCGHHZ00600) 天津大學(xué)自主創(chuàng)新基金資助項(xiàng)目
【分類號】：R392;Q939.4

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1600699