發(fā)布時間：2018-03-10 11:20

  本文選題：凝血致活酶　切入點：冠狀病毒　出處：《中國病毒學(xué)(英文版)》2006年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：研究鑒定激活hfgl2凝血酶原酶基因的SARS冠狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白。從SARS尸檢肺組織中抽提RNA后制備cDNA,分別擴增SARS-CoV的N、S2和M全長基因序列,再分別克隆到真核表達載體pcDNA3.1(+)上。應(yīng)用免疫組織化學(xué)分析鑒定pcDNA3.1-N、pcDNA3.1-M和pcDNA3.1-S2的表達。構(gòu)建人纖維介素(hfgl2)啟動子熒光素酶報告基因質(zhì)粒,并將SARS冠狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白表達質(zhì)粒分別與其共轉(zhuǎn)染以明確激活hfgl2基因轉(zhuǎn)錄的SARS冠狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白。將目的片段克隆至pcDNA3.1(+),經(jīng)酶切鑒定和測序鑒定無誤;免疫組織化學(xué)染色可見明顯的CHO細胞胞漿棕染。與hfgl2啟
[Abstract]:The structural protein of SARS coronavirus which activates the prothrombin gene of hfgl2 was identified. The RNA was extracted from the lung tissue of SARS autopsy to amplify the full-length sequence of SARS-CoV gene. Then the eukaryotic expression vector pcDNA3.1 () was cloned respectively. The expression of pcDNA3.1-M and pcDNA3.1-S2 was identified by immunohistochemical analysis. The luciferase reporter gene plasmid of human fibronectin hfgl2) promoter was constructed. The expression plasmid of SARS coronavirus structural protein was cotransfected with SARS coronavirus structural protein to activate the transcription of hfgl2 gene respectively. The target fragment was cloned into pcDNA3.1 and confirmed by restriction endonuclease digestion and sequencing. Immunohistochemical staining showed that the cytoplasm of CHO cells was brown stained. It was associated with hfgl2.
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院感染免疫研究室感染科 南方醫(yī)院感染內(nèi)科 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院感染免疫研究室感染科 南方醫(yī)院感染內(nèi)科 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院感染免疫研究室感染科 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院感染免疫研究室感染科
【基金】：科技部973-SARS專項(2003CB514112) 教育部首批SARS項目基金(教技司[2003]64號)
【分類號】：R373

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本文編號：1593119