抗人可溶性間皮素相關(guān)蛋白單克隆抗體的制備及特性鑒定
本文選題:間皮素 切入點(diǎn):可溶性間皮素相關(guān)蛋白 出處:《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2007年03期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:目的:制備鼠抗人可溶性間皮素相關(guān)蛋白(SMR)的單克隆抗體(mAb),鑒定其生物學(xué)特性。方法:應(yīng)用計(jì)算機(jī)通過(guò)綜合預(yù)測(cè)對(duì)間皮素(MSLN)進(jìn)行B-細(xì)胞表位預(yù)測(cè)。合成相應(yīng)肽段并免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤技術(shù)制備mAb,利用免疫細(xì)胞化學(xué)和Western blot分析對(duì)所制備的mAb進(jìn)行鑒定。結(jié)果:綜合預(yù)測(cè)方法分析間皮素的抗原表位可能于153-162、282-292及471-481氨基酸殘基或其附近,選擇性合成了可能性最高的位于471-481氨基酸殘基的可溶性間皮素相關(guān)蛋白表位,制備了mAb(2H10),經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)和Western blot分析該抗體具有較高的特異性。結(jié)論:成功地制備了鼠抗人可溶性間皮素相關(guān)蛋白的mAb(2H10),該抗體具有較高的特異性,為進(jìn)一步利用ELISA對(duì)可溶性間皮素相關(guān)蛋白進(jìn)行檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to prepare a monoclonal antibody against human soluble mesothelin-associated protein (SMRs), and to identify its biological characteristics. Methods: B- cell epitopes were predicted by computer, the corresponding peptides were synthesized and BALB/c mice were immunized. MAbs were prepared by hybridoma technique and identified by immunocytochemistry and Western blot analysis. Results: the antigenic epitopes of mesothelin may be located at or near the amino acid residues of 153-162n282-292 and 471-481. Soluble mesothelin-associated protein epitopes located at 471-481 amino acid residues were selectively synthesized. MAb2H10 was prepared, and the antibody was characterized by immunocytochemistry and Western blot. Conclusion: the mAb2H10G antibody against human soluble mesothelin-associated protein has been successfully prepared, and the antibody has high specificity. The results laid a foundation for the further detection of soluble mesothelin-associated proteins by ELISA.
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦產(chǎn)科 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦產(chǎn)科 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦產(chǎn)科 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院科研中心 白求恩國(guó)際和平醫(yī)院 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦產(chǎn)科 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦產(chǎn)科
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30572093) 河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(C2005000804)
【分類(lèi)號(hào)】:R392.11
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1558363
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