發(fā)布時間：2018-03-01 10:03

  本文關(guān)鍵詞： 胚胎生殖干細胞 胚胎成纖維細胞 細胞因子 超微結(jié)構(gòu)　出處：《蘇州大學》2005年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:檢測細胞培養(yǎng)上清液中LIF、SCF和bFGF的水平,探索更完善的人胚胎生殖干細胞(EG細胞)體外培養(yǎng)體系;光鏡觀察人PGCs,透射電鏡觀察人EG細胞的超微結(jié)構(gòu),深入了解人PGCs和人EG細胞的形態(tài)學特征。 方法:采用組織塊培養(yǎng)法體外培養(yǎng)人EG細胞,收集不同生長階段(第3d和第9d)的細胞培養(yǎng)上清液,用雙抗體夾心ABC-ELISA法定量測定其中人LIF、SCF、bFGF的水平;取胚胎兩側(cè)生殖腺嵴、中腎嵴常規(guī)HE染色,制備切片,在光鏡下觀察并拍攝照片;收集足量的人EG細胞和胚胎成纖維細胞制備超薄切片,在透射電鏡下觀察并拍攝照片。 結(jié)果:第9d培養(yǎng)液中LIF濃度(55.25±6.51pg/ml),高于第3d(46.56±0.89pg/ml),差別有統(tǒng)計意義(P0.05);第9d SCF濃度(90.39±3.98pg/ml),顯著高于第3d(78.47±2.03pg/ml),差別有高度統(tǒng)計意義(P0.01);第9d bFGF濃度(26.06±1.73pg/ml),顯著高于第3d(22.13±1.08pg/ml),差別有高度統(tǒng)計意義(P0.01)。光鏡下可見人PGCs呈索條狀排列或零星散布于組織中,細胞大,呈圓形或橢圓形,輪廓清楚。核質(zhì)比高,細胞核大,著色深,呈圓形或橢圓形,呈偏心位,核仁較明顯。透射電鏡下觀察人EG細胞核質(zhì)比高,細胞質(zhì)少,細胞器不發(fā)達,
[Abstract]:Objective: to detect the levels of LIF-SCF and bFGF in the supernatant of cell culture, to explore a more perfect culture system of human embryonic reproductive stem cells (EG), to observe human PGCs by light microscope and to observe the ultrastructure of EG cells by transmission electron microscope (TEM). To understand the morphological characteristics of human PGCs and human EG cells. Methods: human EG cells were cultured in vitro by tissue mass culture. The supernatants of different growth stages (3rd and 9th days) were collected. The levels of human LIF-SCFbFGF were measured by double antibody sandwich ABC-ELISA assay, and the gonadal cristae of both sides of embryo were obtained. The mesonephric cristae were stained with HE, sections were prepared, observed and photographed under light microscope, and ultrathin sections were prepared by collecting enough human EG cells and embryonic fibroblasts, and were observed and photographed under transmission electron microscope (TEM). Results: the concentration of LIF in the culture medium on the 9th day was 55.25 鹵6.51 PG / ml, which was higher than that in the 3rd day (46.56 鹵0.89 PG / ml), the difference was statistically significant (P 0.05), and on the 9th day, the concentration of SCF was 90.39 鹵3.98 PG / ml, which was significantly higher than that on the 3rd day (78.47 鹵2.03 PG / ml), and the bFGF concentration on the 9th day was 26.06 鹵1.73 PG / ml, which was significantly higher than that on the 3rd day (22.13 鹵1.08pg / ml). Under the microscope, we can see that the human PGCs is arranged in the form of cable or scattered in the tissue. The cells were large, round or oval, with clear outline, high ratio of nucleus to cytoplasm, large nucleus, deep staining, round or ellipse, eccentric position, obvious nucleolus, high cytoplasm ratio and less cytoplasm of human EG observed by transmission electron microscope. The organelles are underdeveloped,
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R321

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本文編號：1551451