人參愈傷組織細(xì)胞系表達(dá)乙肝病毒表面抗原的研究
本文關(guān)鍵詞: 乙肝表面抗原 人參愈傷組織細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 出處:《吉林大學(xué)》2005年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:為了能夠獲得更加經(jīng)濟(jì)、高效、安全的乙肝疫苗,本實驗室運用根瘤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)染的方法,將乙肝表面抗原(HBsAg)基因轉(zhuǎn)入人參愈傷組織細(xì)胞,篩選出穩(wěn)定生長的轉(zhuǎn)化體細(xì)胞,命名為CS83 細(xì)胞系。 本研究分別應(yīng)用ELISA、Western blotting 和免疫組織化學(xué)的方法,對CS83 細(xì)胞表達(dá)的HBsAg 進(jìn)行了鑒定和細(xì)胞內(nèi)定位。小鼠的注射免疫和家兔的口服免疫實驗都證明,該細(xì)胞系表達(dá)的HBsAg 在動物體內(nèi)能有效地誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,產(chǎn)生特異性抗體。同時發(fā)現(xiàn),人參愈傷組織細(xì)胞內(nèi)可能存在著某些能起到免疫佐劑作用的物質(zhì)。在優(yōu)化CS83 細(xì)胞固體培養(yǎng)條件的同時,進(jìn)行了細(xì)胞的液體化培養(yǎng),建立起了分散程度較好的懸浮細(xì)胞系,為CS83 細(xì)胞的工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。 本研究為利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)醫(yī)用蛋白提供了技術(shù)平臺,為其他藥用植物的開發(fā)利用奠定了堅實的基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to obtain more economical, efficient and safe hepatitis B vaccine, Agrobacterium tumefaciens was used to transfect hepatitis B surface antigen HBsAg gene into ginseng callus cells. A stable growth transforming somatic cell line was selected and named as CS83 cell line. In this study, ELISAL Western blotting and immunohistochemical methods were used respectively. The expression of HBsAg in CS83 cells was identified and localized in cells. Both the injection immunization of mice and the oral immunization of rabbits were proved. The HBsAg expressed by the cell line can effectively induce immune response and produce specific antibodies in animals. There may be some substances in callus of ginseng which can act as immune adjuvant. The liquid culture of CS83 cells was carried out at the same time as optimizing the conditions of solid culture. A suspension cell line with good dispersion was established, which laid a foundation for the industrial production of CS83 cells. This study provides a technical platform for the production of medical proteins by using plant tissue culture technology and lays a solid foundation for the development and utilization of other medicinal plants.
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號】:R392
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:1486041
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