大腸埃希菌臨床分離株高產(chǎn)AmpC酶與基因介導(dǎo)、突變表達(dá)方式的研究
本文關(guān)鍵詞: 大腸埃希菌(E.coli) AmpC酶 ESBLs 質(zhì)粒 ampC啟動(dòng)子 衰減子 外膜蛋白 出處:《南京師范大學(xué)》2006年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:大腸埃希菌(E.coli)是引起尿路感染、呼吸道感染、傷口感染甚至全身感染的常見病原菌之一,它對三代頭孢菌素耐藥的主要原因是產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶。ESBLs來自突變的廣譜β-內(nèi)酰胺酶(如TEM-1,TEM-2,SHV-1),由質(zhì)粒攜帶能夠水解氨氧頭孢菌素和單環(huán)β-內(nèi)酰胺類藥物,可被克拉維酸(CA)抑制,最常見于E.coli和克雷伯菌屬,也見于其他腸桿菌科細(xì)菌、銅綠假單胞菌、洋蔥伯克霍德菌等細(xì)菌。AmpC酶有染色體介導(dǎo)和質(zhì)粒介導(dǎo)兩種基因攜帶狀態(tài),質(zhì)粒介導(dǎo)的基因來源于染色體。AmpC酶能夠水解氨氧頭孢菌素、頭霉菌素和單環(huán)β-內(nèi)酰胺類藥物,可被鄰氯西林(CLO)抑制,不能被CA等其他β-內(nèi)酰胺酶抑制劑抑制。染色體編碼的ampC基因存在于大多數(shù)革蘭陰性桿菌的染色體上(克雷伯菌屬和奇異變形桿菌缺乏,沙門菌屬尚不確定),呈誘導(dǎo)表達(dá);質(zhì)粒編碼的ampC基因多為非誘導(dǎo)表達(dá)。 E.coli染色體上攜帶ampC基因,但其操縱子與其他細(xì)菌染色體的ampC操縱子不同,因缺少調(diào)控基因ampR,呈低水平表達(dá)狀態(tài),酶產(chǎn)量非常低,臨床意義不大。質(zhì)粒型ampC基因轉(zhuǎn)入或染色體上ampC基因啟動(dòng)或衰減序列突變,ampC結(jié)構(gòu)基因突變或擴(kuò)增,以及ampC調(diào)節(jié)基因的突變均能導(dǎo)致AmpC酶的高表達(dá)。質(zhì)粒型AmpC酶和染色體突變型AmpC酶的出現(xiàn)不僅使E.coli的耐藥性增強(qiáng)而且直接干擾了臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對ESBLs的檢測,增加了臨床治療的難度。 本課題收集南京軍區(qū)南京總醫(yī)院臨床微生物實(shí)驗(yàn)室2001年1月至2004年10月臨床各類標(biāo)本中分離的可疑同時(shí)產(chǎn)AmpC酶和ESBLs或單產(chǎn)AmpC酶的40株E.coli,采用一系列的方法對耐藥表型、高活性β-內(nèi)酰胺酶的類型和特點(diǎn)、ampC基因攜帶和突變表達(dá)方式、以及細(xì)菌外膜蛋白的改變進(jìn)行研究,并探討提高ESBLs檢出率和區(qū)別AmpC酶的、適用于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的檢測方法。 在抗菌藥物敏感試驗(yàn)中,,40株菌均呈多重耐藥,對頭孢三嗪(CRO)、頭孢噻肟(CTX)和頭孢他啶(CAZ)3種三代頭孢菌素中的2種以上出現(xiàn)耐藥,對環(huán)丙沙
[Abstract]:Escherichia coli is one of the common pathogens causing urinary tract infection respiratory tract infection wound infection and even systemic infection. The main reason for its resistance to the third generation cephalosporins is the production of extended-spectrum 尾 -lactamases (ESBLss) and AmpC enzymes. ESBLs are derived from mutated broad-spectrum 尾 -lactamases (such as TEM-1). TEM-2HV-1, carried by plasmids capable of hydrolyzing aminoglycocephalin and monocyclic 尾 -lactam, can be inhibited by clavulanate (CAA), most commonly in E. coli and Klebsiella. Also found in other Enterobacteriaceae bacteria, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cepacia and other bacteria. AMPC enzyme has chromosomal and plasmide-mediated gene carrying state. Plasmid mediated genes derived from chromosomes. AMPC can hydrolyze amoxycephalosporins, cephalosporins and monocyclic 尾 -lactams, which can be inhibited by o-chloracillin (CLO). AmpC genes encoded by chromosomes are present on the chromosomes of most gram-negative bacilli (Klebsiella and Proteus mirabilis are deficient). Salmonella is still unknown and is induced to express. Most of the ampC genes encoded by plasmids were uninduced. Coli chromosomes carry the ampC gene, but its operon is different from the ampC operon of other bacteria chromosomes, because of the lack of regulation gene ampr, it is low level expression. The plasmid type ampC gene was transferred into or the chromosome of ampC gene initiated or attenuated sequence mutation or mutation of ampC structure gene mutation or amplification. The mutation of ampC regulatory gene can lead to the high expression of AmpC enzyme. The emergence of plasmid type AmpC enzyme and chromosome mutant AmpC enzyme not only increase the resistance of E. coli but also directly dry it. It interferes with the detection of ESBLs in clinical microbiology laboratory. It increases the difficulty of clinical treatment. This study collected suspected simultaneous production of AmpC enzyme and ESBLs or Amp per unit from clinical microbiology laboratory of Nanjing General Hospital of Nanjing military region from January 2001 to October 2004. 40 strains of C enzyme E. coli. A series of methods were used to study the phenotype of drug resistance, the type and characteristics of high activity 尾 -lactamases, and the expression patterns of AMPC gene and the changes of bacterial outer membrane proteins. The methods of improving the detection rate of ESBLs and differentiating AmpC enzyme were discussed. In antimicrobial susceptibility test, 40 strains were multidrug resistant to ceftriaxine (CRO). Cefotaxime (CTX) and ceftazidime (Ceftazidime) were resistant to ceftazidime in 3 generations of cephalosporins.
【學(xué)位授予單位】:南京師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:R378.2
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8 詹q
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